Anticorpo monoclonale coniugato anti-VPS18 di coniglio per WB ed ELISA - Q9P253

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di VPS18

• VPS18 (Proteina omologa associata all'ordinamento vacuolare 18) è una subunità core di 110 kDa dei complessi VPS-C, essenziale per l'ancoraggio e la fusione delle membrane nelle vie endocitiche e autofagiche.
• Agisce come componente centrale dei complessi di ancoraggio endosomiali HOPS e CORVET, che mediano la fusione di membrana dipendente da SNARE e la conversione da Rab5 a Rab7 durante la maturazione dell'endosoma (PubMed:11382755, 23351085, 24554770). Riferimenti correlati: PMID:11382755, PMID:23351085, PMID:24554770
• VPS18 è necessaria per la fusione di endosomi e autofagosomi con i lisosomi, un passaggio critico nella degradazione terminale sia nelle vie endocitiche che autofagiche (PubMed:25783203). Riferimenti correlati: PMID:25783203
• La proteina si localizza in endosomi tardivi, lisosomi, endosomi precoci, autofagosomi e vescicole rivestite di clatrina, riflettendo il suo ampio ruolo nel traffico intracellulare.
• VPS18 contiene domini coiled-coil e un motivo zinc-finger, indicando funzioni nelle interazioni proteina-proteina e nella coordinazione dei metalli, ed è regolata da modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione.
• È espressa in modo ubiquitario, con i livelli più alti nel cuore, suggerendo un coinvolgimento diffuso ma variabile nei tessuti nel trasporto vescicolare.
• VPS18 contribuisce anche allo sviluppo dei dendriti nelle cellule di Purkinje (Per somiglianza), implicandola nel traffico di membrana neuronale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blot, è attesa una banda specifica vicino a 110 kDa; ottimizzare le condizioni di SDS-PAGE e il trasferimento per proteine ad alto peso molecolare.
• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1-100 di VPS18 umano; considerare l'uso di controlli di blocco con peptide o knockout per confermare la specificità.
• Nelle applicazioni ELISA, il peptide immunizzante può fungere da controllo positivo; sono raccomandati formati ELISA indiretti.
• Validare l'anticorpo in linee cellulari umane con espressione nota di VPS18; l'arricchimento delle frazioni endosomiali/lisosomiali può migliorare il rilevamento.
• Essendo un anticorpo monoclonale di coniglio, questo reagente dovrebbe offrire alta affinità e prestazioni consistenti tra i lotti; diluizioni ottimali e parametri di incubazione dovrebbero essere determinati empiricamente.

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