Anticorpo policlonale anti-VPS28 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9UK41

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di VPS28

• VPS28 è l'omologo umano del lievito Vps28, un componente principale dei complessi di ordinamento endosomiale richiesti per il trasporto (ESCRT)-I, noto anche come subunità del complesso ESCRT-I VPS28.
• Come parte dell'ESCRT-I, VPS28 funziona da regolatore del traffico vescicolare, mediando specificamente l'ordinamento delle proteine di membrana ubiquitinate nei corpi multivesicolari (MVB) per la degradazione lisosomiale.
• Gli studi di localizzazione subcellulare indicano che VPS28 è associato alla membrana cellulare e alla membrana dell'endosoma tardivo, coerente con il suo ruolo nell'ordinamento del cargo endosomiale.
• La proteina subisce acetilazione ed è soggetta a splicing alternativo, contribuendo alla diversità funzionale; è stata identificata in analisi proteomiche e serve come componente del proteoma di riferimento.
• Il peso molecolare previsto di VPS28 è di circa 25 kDa (UniProt: 25425 Da), corrispondente alla banda osservata nelle applicazioni Western blot.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende il VPS28 umano a lunghezza intera (aa 1-221), che può fornire un'ampia copertura dell'epitopo. Per il Western blot, considerare di iniziare con un intervallo di diluizione standard (es. 1:500–1:2000) e validare utilizzando lisati da linee cellulari umane, di topo o di ratto note per esprimere VPS28.
• Per IF/ICC, ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione e includere i controlli appropriati per confermare la specificità nella colorazione della membrana endosomiale.
• Nell'ELISA, l'abbinamento di questo anticorpo policlonale con un anticorpo di rilevamento abbinato può aumentare la sensibilità; determinare empiricamente le concentrazioni dell'antigene di rivestimento e i titoli degli anticorpi.
• Data la reattività crociata dell'anticorpo con topo e ratto, è adatto per studi comparativi tra queste specie, ma verificare sempre nel sistema di campione pertinente.

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