Anticorpo policlonale coniglio anti-VPS35 per WB, ELISA - Q96QK1

Specifiche e parametri fondamentali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di VPS35

• VPS35 (Proteina 35 associata all'ordinamento delle proteine vacuolari) è un componente fondamentale del complesso selettivo del carico del retromer (CSC), essenziale per prevenire la degradazione lisosomiale di proteine di carico transmembrana selezionate; è richiesto per il trasporto retrogrado di IGF2R e SLC11A2 dagli endosomi al TGN e per la transcitosi pIgR-pIgA. Riferimenti correlati: PMID:15078940, PMID:15247922, PMID:20164305
• Il retromer CSC interagisce con sorting nexins distinti (SNX3, SNX27, SNX-BAR) per definire percorsi di traffico specializzati; ad esempio, SNX3-retromer media il trasporto retrogrado endosoma-TGN di WLS. Riferimenti correlati: PMID:30213940
• VPS35 facilita il reclutamento del complesso WASH e di TBC1D5 sulle membrane endosomiali, collegando la funzione del retromer alla polimerizzazione dell'actina e al riciclo delle proteine regolatorie. Riferimenti correlati: PMID:22070227, PMID:28892079, PMID:20923837
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, la membrana e i compartimenti endosomiali (endosomi precoci e tardivi), coerente con il suo ruolo nel traffico intracellulare.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione (parola chiave "Fosfoproteina"), suggerendo un controllo regolatorio dell'assemblaggio del retromer e dell'ordinamento del carico.
• L'espressione tissutale è ubiquitaria, con livelli elevati nel cuore, cervello, placenta, muscolo scheletrico, milza, timo, testicolo, ovaio, intestino tenue, rene e colon.
• Le mutazioni in VPS35 sono associate alla malattia di Parkinson a esordio tardivo autosomico dominante (PARK17), implicando la disfunzione del retromer nella neurodegenerazione.
• Inoltre, VPS35 svolge un ruolo nelle interazioni ospite-virus; il retromer CSC media l'uscita del papillomavirus umano dagli endosomi precoci durante l'infezione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aminoacidi 1-250) di VPS35 umano, che è altamente conservata; la reattività crociata con il mouse è confermata e la reattività con altre specie è possibile data l'omologia di sequenza.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda di circa 92 kDa. Data l'espressione ubiquitaria della proteina, segnali positivi possono essere previsti in vari lisati cellulari umani e murini (es. HeLa, HEK293 o tessuto cerebrale murino); validare nel proprio sistema di campione specifico.
• Nell'ELISA, considerare l'uso di rivestimento diretto con VPS35 ricombinante o saggi di cattura; titolare l'anticorpo per stabilire le diluizioni di lavoro ottimali.
• Per l'immunofluorescenza o l'immunoistochimica, notare che questo è un anticorpo policlonale; potrebbe essere necessaria una validazione aggiuntiva a causa della potenziale reattività crociata con altri membri della famiglia VPS o componenti del retromer.
• Conservare a -20°C in aliquote ed evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento per mantenere l'attività.

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