Anticorpo policlonale anti-VPS54 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9P1Q0

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di VPS54

• VPS54 (Vacuolar protein sorting-associated protein 54) è nota anche come proteina 8 del carcinoma epatocellulare (HCC8), antigene tumorale SLP-8p e PPP1R164; è un componente del complesso GARP (Golgi-associated retrograde protein).
• Agisce come componente del complesso GARP che media il trasporto retrogrado dagli endosomi precoci e tardivi al trans-Golgi network (TGN).
• Il complesso GARP è necessario per il ciclo dei recettori del mannosio 6-fosfato tra il TGN e gli endosomi, essenziale per il corretto smistamento lisosomiale delle idrolasi acide come la CTSD.
• All'interno del complesso GARP, VPS54 è necessaria per ancorare il complesso al TGN; non è coinvolta nel riciclo endocitico. Riferimenti correlati: PMID:18367545 PMID:25799061
• Localizzazione subcellulare: apparato di Golgi, membrana del trans-Golgi network.
• Modifiche post-traduzionali e caratteristiche: fosfoproteina, contiene domini coiled-coil ed è soggetta a splicing alternativo.
• Il peso molecolare previsto è di circa 111 kDa (annotazione UniProt: 110.589 Da).

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 420–720, una regione che probabilmente comprende motivi coiled-coil importanti per l'assemblaggio del complesso; considerare l'utilizzo di queste informazioni sull'epitopo durante la progettazione di saggi competitivi o studi di troncatura.
• Per il Western blotting, potrebbe essere necessaria una serie di diluizioni per rilevare la VPS54 endogena al peso molecolare previsto di 111 kDa; validare nel sistema di campioni pertinente.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, le condizioni di fissazione e permeabilizzazione devono essere ottimizzate per preservare la localizzazione della membrana del Golgi/TGN; si raccomanda la co-colorazione con marcatori del TGN (es. TGN46).
• L'ELISA può essere applicato per la rilevazione quantitativa; assicurarsi che i controlli di proteina ricombinante o peptide corrispondano alla regione dell'immunogeno per una quantificazione accurata.
• La reattività crociata con umano e topo è stata confermata; per altre specie, eseguire l'allineamento delle sequenze e test preliminari.

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