Anticorpo policlonale anti-WDFY4 per WB, ELISA - Q6ZS81

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di WDFY4

• WDFY4 (proteina 4 contenente ripetizioni WD e dominio FYVE) è nota anche come C10orf64 e codifica una grande proteina di circa 354 kDa contenente domini di ripetizione WD e un dominio FYVE.
• Gioca un ruolo critico nella regolazione della presentazione incrociata degli antigeni virali e tumorali nelle cellule dendritiche convenzionali di tipo 1 (cDC1). Meccanicamente, agisce vicino alla membrana plasmatica e interagisce con le membrane endosomiali per promuovere il traffico degli antigeni dagli endosomi al citosol.
• Coinvolto nella sopravvivenza delle cellule B attraverso la regolazione dell'autofagia, collegando la risposta immunitaria adattiva ai pathway di degradazione cellulare.
• Si localizza agli endosomi precoci e al reticolo endoplasmatico, coerente con il suo ruolo nel traffico degli antigeni endosomiali e nella dinamica delle membrane.
• Associato allo splicing alternativo, producendo multiple isoforme che possono avere diversità tissutale o funzionale.
• Contiene ripetizioni WD, note per facilitare le interazioni proteina-proteina, e un dominio FYVE che lega il fosfatidilinositolo 3-fosfato, indirizzandolo alle membrane endosomiali.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la regione N-terminale (amminoacidi 1–160) di WDFY4 umano; questa regione può essere conservata tra le isoforme, ma l'espressione specifica dell'isoforma dovrebbe essere considerata durante la validazione.
• Per il Western blot (WB), la proteina a lunghezza intera è di circa 354 kDa; utilizzare gel SDS-PAGE a bassa percentuale appropriati, tempi di trasferimento estesi e metodi di rilevamento ad alta sensibilità per risolvere e rilevare questa proteina ad alto peso molecolare.
• Validare la specificità dell'anticorpo in tipi cellulari umani rilevanti noti per esprimere WDFY4, come le cellule dendritiche o le linee cellulari B, utilizzando controlli positivi e negativi.
• Per ELISA, ottimizzare la concentrazione dell'antigene di rivestimento e le diluizioni dell'anticorpo utilizzando l'immunogeno ricombinante o la proteina nativa da lisati cellulari umani.
• Si noti che questo anticorpo è riportato per reagire con campioni umani; la reattività crociata con altre specie non è stata testata e dovrebbe essere determinata sperimentalmente se necessario.

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