Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-WDR4 per WB, IHC-P, ChIP, ELISA - P57081

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di WDR4

• WDR4 è il componente non catalitico del complesso metiltransferasi METTL1-WDR4, catalizzando la formazione di N(7)-metilguanina nei tRNA, mRNA e miRNA (PubMed:12403464, PubMed:31031083, PubMed:31031084). Riferimenti correlati: PMID:12403464 PMID:31031083 PMID:31031084
• Come proteina scaffold, WDR4 si lega ai substrati tRNA e dirige METTL1 a metilare la guanina in posizione 46 (m7G46) nei tRNA con un motivo 5'-RAGGU-3', stabilizzando la struttura terziaria del tRNA e proteggendo i tRNA dal degrado (PubMed:36599982, PubMed:36599985, PubMed:34352206, PubMed:34352207). Riferimenti correlati: PMID:36599982 PMID:36599985 PMID:34352206 PMID:34352207
• WDR4-METTL1 metila anche siti interni in un sottoinsieme di mRNA e specifici miRNA come let-7, influenzando il loro processamento e stabilità (PubMed:31031084, PubMed:37379838, PubMed:31031083). Riferimenti correlati: PMID:31031084 PMID:37379838 PMID:31031083
• Oltre alla sua funzione di metiltransferasi, WDR4 contribuisce alla stabilità del genoma localizzandosi ai siti di replicazione del DNA e regolando l'attività endonucleasica di FEN1 (PubMed:26751069). Riferimenti correlati: PMID:26751069
• WDR4 si localizza principalmente nel nucleo e si associa ai cromosomi, coerente con i suoi ruoli nella modifica dell'RNA e nella replicazione del DNA.
• WDR4 subisce modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione, e le varianti associate alla malattia sono implicate in disturbi dello sviluppo e neurologici come l'epilessia e la disabilità intellettiva.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting, ci si aspetta una banda specifica a circa 45kDa. Includere appropriati controlli positivi e negativi (es. lisati sovraesprimenti o knockout per WDR4) per confermare la specificità.
• Per IHC-P, ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e validare i pattern di colorazione in tessuti noti per esprimere WDR4. Utilizzare controlli isotipici per valutare il background.
• Negli saggi ChIP, considerare che WDR4 si associa alla cromatina e ai siti di replicazione del DNA; progettare primer che mirano a regioni genomiche di interesse e includere loci di controllo negativi.
• Le applicazioni ELISA possono impiegare l'anticorpo per il rilevamento diretto o basato su cattura; standardizzare le concentrazioni di rivestimento e bloccare il legame non specifico.
• L'immunogeno copre gli amminoacidi 250–350; pertanto, l'anticorpo riconosce un epitopo interno conservato tra WDR4 umano, murino e ratto. Verificare la reattività nel proprio sistema modello.

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