Anticorpo monoclonale Anti-WEE1 per IHC-P, ELISA - P30291

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di WEE1

• WEE1 (proteina chinasi simile a Wee1) è una tirosin-chinasi nucleare che agisce come regolatore negativo critico della transizione del ciclo cellulare G2/M tramite fosforilazione e inibizione del complesso ciclina B1-CDK1.
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• Fosforila specificamente CDK1 sulla tirosina-15, prevenendo l'ingresso prematuro in mitosi; la sua attività raggiunge il picco durante le fasi S e G2 e diminuisce quando le cellule entrano in mitosi, in correlazione con la sua iperfosforilazione e successiva degradazione.
• WEE1 si localizza principalmente nel nucleo, dove protegge il genoma garantendo la corretta tempistica dell'ingresso in mitosi.
• La proteina contiene domini chinasi, di legame all'ATP e di legame ai metalli conservati, tipici delle tirosin-chinasi, e la sua attività è modulata tramite fosforilazione e ubiquitinazione.
• Nomi alternativi di WEE1 sono WEE1A, WEE1hu e chinasi Wee1A; l'identificatore del gene umano è 7465.
• Le parole chiave UniProt associate a WEE1 comprendono ciclo cellulare, mitosi, nucleo, chinasi, fosfoproteina, splicing alternativo e coniugazione dell'ubiquitina, che riflettono le sue funzioni regolatorie.
• La proteina WEE1 umana ha un peso molecolare previsto di ~71,6 kDa (UniProt), coerente con il prodotto da 72 kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 1-100 del WEE1 umano (NP_003381.1). Questa regione N-terminale può essere adatta per rilevare sia la forma full-length che le varianti di splicing, ma si consiglia la validazione nel sistema di campione di interesse.
• Per applicazioni IHC-P, si consiglia di testare un intervallo di diluizioni dell'anticorpo e metodi di recupero dell'antigene, poiché si prevede uno schema di colorazione nucleare; la reattività crociata dell'anticorpo con il WEE1 di topo può facilitare gli studi su modelli murini.
• Per l'ELISA, è raccomandata l'ottimizzazione dell'antigene di rivestimento e delle condizioni di rilevazione; l'abbinamento con un anticorpo di cattura o di rilevazione adatto può aumentare la sensibilità del test.
• Poiché i livelli della proteina WEE1 fluttuano durante il ciclo cellulare, la sincronizzazione delle colture cellulare e la tempistica appropriata della raccolta dei campioni possono migliorare la coerenza del rilevamento.

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