Anticorpo monoclonale di coniglio anti-WIF1 per WB, IF-P, ELISA - Q9Y5W5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di WIF1

• WIF1 (fattore 1 inibitore di Wnt) è una proteina secreta che agisce come regolatore negativo della via di segnalazione Wnt, legandosi direttamente alle proteine WNT e inibendone le attività a valle.
• La proteina svolge un ruolo cruciale nei processi dello sviluppo, inclusa la segmentazione del mesoderma, modulando la formazione del gradiente Wnt e la trasduzione del segnale.
• Strutturalmente, WIF1 contiene molteplici domini simili all'EGF e un peptide segnale per la secrezione; viene modificata post-traduzionalmente mediante glicosilazione e formazione di ponti disolfuro.
• In quanto glicoproteina secreta, WIF1 è localizzata nello spazio extracellulare e può anche essere associata alla superficie cellulare o alla matrice extracellulare attraverso interazioni con i ligandi Wnt.
• WIF1 è classificata come proteina dello sviluppo e come membro della via di segnalazione Wnt, identificata mediante proteomica e supportata da una struttura 3D, a sottolinearne la rilevanza biologica.
• L'espressione aberrante di WIF1, spesso dovuta a ipermetilazione del promotore, è implicata in diversi tumori, rendendola un bersaglio prezioso per la ricerca sul cancro e lo sviluppo di test diagnostici.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 29–379 (quasi l'intera lunghezza di WIF1 umano), pertanto l'anticorpo potrebbe riconoscere preferenzialmente la conformazione nativa rispetto agli epitopi denaturati; validare le prestazioni nelle condizioni specifiche di preparazione del campione.
• Per il Western blot, è prevista una banda intorno a 42 kDa; valutare l'uso di agenti riducenti e protocolli di riscaldamento appropriati per tenere conto delle strutture con ponti disolfuro.
• Nell'immunofluorescenza (IF-P), verificare i metodi ottimali di fissazione e permeabilizzazione per le proteine secrete o associate alla matrice extracellulare e includere controlli appropriati.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere valutato come reagente di cattura o di rilevazione in formati sandwich, ma la reattività crociata e gli effetti della matrice devono essere valutati utilizzando proteine ricombinanti e campioni biologici pertinenti.
• È riportata una reattività crociata con il topo; confermare la rilevazione in tessuti o lisati cellulari di topo e considerare le possibili differenze specie-specifiche nella glicosilazione o nella processazione.

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