Anticorpo Policlonale Anti-WRAP53 di Coniglio per WB, ELISA - Q9BUR4

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di WRAP53

• WRAP53 (Telomerase Cajal body protein 1, TCAB1, WDR79) è una proteina chaperone dell'RNA che svolge un ruolo chiave nel mantenimento dei telomeri e nella localizzazione dell'RNA ai corpi di Cajal. Riferimenti correlati: PMID:29695869, PMID:29804836

• Riconosce e lega specificamente la scatola del corpo di Cajal (CAB box) presente nei piccoli RNA del corpo di Cajal (scaRNAs) e nel componente RNA stampo della telomerasi (TERC), controllando il ripiegamento del dominio CR4/CR5 di TERC, cruciale per l'attività telomerasica. Riferimenti correlati: PMID:19285445, PMID:20351177, PMID:29804836

• Come componente essenziale del complesso oloenzimatico della telomerasi, WRAP53 è necessario per stimolare l'attività catalitica della telomerasi, consegnare TERC ai telomeri durante la fase S e garantire la replicazione delle estremità cromosomiche. Riferimenti correlati: PMID:19179534, PMID:20351177, PMID:26170453, PMID:27525486, PMID:29804836

• Oltre alla biologia dei telomeri, WRAP53 è necessario per la formazione dei corpi di Cajal, mediando la localizzazione degli scaRNAs in questi sottodomini nucleari. Riferimenti correlati: PMID:19285445, PMID:21072240

• In seguito a danno al DNA, WRAP53 viene fosforilato da ATM e si rilocalizza alle rotture del doppio filamento di DNA, dove promuove sia la ricombinazione omologa (HR) che la giunzione delle estremità non omologa (NHEJ) reclutando l'ubiquitina ligasi RNF8. Riferimenti correlati: PMID:25512560, PMID:27715493

• WRAP53 si localizza prevalentemente nel nucleo, nei corpi di Cajal e nei telomeri, in linea con i suoi molteplici ruoli nel traffico dell'RNA, nell'omeostasi dei telomeri e nella riparazione del DNA.

• Espresso in modo ubiquitario in tutti i tessuti umani, WRAP53 appartiene alla famiglia delle proteine WD repeat e possiede multipli domini WD40 per le interazioni proteiche.

• Clinicamente, le mutazioni di WRAP53 sono associate alla discheratosi congenita, sottolineandone l'importanza nei disturbi legati ai telomeri.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 62-160 di WRAP53 umano) mira a una regione conservata nel topo, supportando la reattività crociata riportata; tuttavia, si raccomanda la validazione nel sistema di campionamento rilevante.
• Per il Western blot, WRAP53 endogeno può essere rilevato a circa 59 kDa in lisati cellulari totali da linee cellulari umane o di topo; includere controlli positivi e negativi appropriati (ad es., knockdown con siRNA) può aiutare a confermare la specificità.
• Nelle applicazioni ELISA, considerare l'ottimizzazione dell'antigene di rivestimento e delle diluizioni dell'anticorpo; la proteina WRAP53 ricombinante o i lisati cellulari possono servire come antigeni.
• Poiché WRAP53 subisce fosforilazione in seguito a danno al DNA, l'uso di inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi può essere importante per preservare lo stato di modificazione, se rilevante per il contesto sperimentale.
• Essendo un anticorpo policlonale, la consistenza da lotto a lotto dovrebbe essere monitorata; è consigliabile richiedere un lotto di ritenzione per studi a lungo termine.
• Non si può escludere una reattività crociata con altre proteine WD repeat; si suggerisce di verificare l'identità della banda tramite spettrometria di massa o ablazione genetica per esperimenti critici.

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