Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-WT1 per WB, IHC-P, ELISA - P19544

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del WT1

• WT1 (proteina del tumore di Wilms 1, nota anche come WT33) è un fattore di trascrizione con multiple isoforme generate da splicing alternativo, incluse le varianti con inserimento KTS. La proteina contiene quattro domini a dito di zinco C-terminali che mediano il legame al DNA.
• Riconosce la sequenza consenso del DNA 5'-GCG(T/G)GGGCG-3' e regola geni bersaglio come EPO, svolgendo un ruolo critico nello sviluppo del sistema urogenitale. Riferimenti correlati: PMID:7862533 PMID:17716689 PMID:25258363
• Il WT1 exhibits ruoli duali dipendenti dal contesto come soppressore tumorale e oncogene in vari tumori, con funzioni specifiche per isoforma.
• Le isoforme prive del motivo KTS funzionano principalmente come fattori di trascrizione, mentre le isoforme contenenti KTS possono interagire con l'mRNA e partecipare al metabolismo o allo splicing dell'mRNA. Riferimenti correlati: PMID:15520190 PMID:16934801 PMID:19123921
• La localizzazione subcellulare include nucleo, nucleolo, nucleoplasma, speckles nucleari e citoplasma, riflettendo i suoi diversi ruoli funzionali.
• Espresso prevalentemente nel rene e in un sottogruppo di cellule ematopoietiche, coerente con il suo coinvolgimento nello sviluppo renale ed ematologico e nelle malignità.
• Le modificazioni post-traduzionali includono ubiquitinazione (coniugazione Ubl) e coordinazione di ioni metallici da parte dei domini a dito di zinco, essenziali per il legame al DNA e l'attività trascrizionale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 60–250 del WT1 umano, coprendo il dominio regolatore N-terminale a monte della regione a dito di zinco. Questo design potrebbe favorire il riconoscimento di isoforme o stati di attivazione specifici; validare il modello di reattività nel contesto sperimentale.
• Il peso molecolare previsto è di circa 49 kDa; confermare la dimensione della banda tramite WB in lisati rilevanti (es. linee cellulari renali) e considerare possibili modificazioni post-traduzionali che potrebbero causare spostamenti.
• Per IHC-P, i protocolli di recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore) dovrebbero essere ottimizzati, e l'espressione nel rene, testicolo o tessuti tumorali può servire come controllo positivo.
• L'anticorpo cross-reagisce con il WT1 di topo e ratto, consentendo studi traslazionali su modelli roditori; tuttavia, si consiglia la validazione in ogni specie.
• Per applicazioni ELISA, si consiglia l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento che miri a un epitope non sovrapposto per garantire la specificità dell'analisi.

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