Anticorpo monoclonale di coniglio anti-XIAP (convalidato KO) per WB, ELISA - P98170

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di XIAP

• XIAP (inibitore dell'apoptosi legato al cromosoma X), noto anche come BIRC4, IAP3 o hILP, è un membro della famiglia degli inibitori dell'apoptosi (IAP), caratterizzato da tre domini baculovirali IAP repeat (BIR) e un dominio zinc finger di tipo RING C-terminale.
• Agisce come un inibitore diretto e potente delle caspasi; lega i siti attivi di CASP3 e CASP7, ostacolando l'ingresso del substrato, e mantiene CASP9 in uno stato monomerico inattivo, bloccando così l'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:11257230 PMID:11257231 PMID:12620238 PMID:16352606
• Funziona come una ligasi E3 ubiquitina-proteina, mediando sia l'ubiquitinazione degradativa che non degradativa (incluse le catene legate a Lys-63) di bersagli come RIPK1, RIPK2, DIABLO/SMAC e MAP3K2/MEKK2, modulando così le vie di segnalazione NF-kB e MAP chinasi. Riferimenti correlati: PMID:17560374 PMID:17967870 PMID:19473982
• Regola l'immunità innata catalizzando la poliubiquitinazione legata a Lys-63 di RIPK2 a valle di NOD1 e NOD2, trasformando RIPK2 in una piattaforma di impalcatura per il complesso LUBAC e l'attivazione a valle di NF-kB e MAP chinasi. Riferimenti correlati: PMID:19667203 PMID:22607974 PMID:29452636
• Coinvolto nell'omeostasi del rame tramite l'ubiquitinazione e la degradazione proteasomiale di COMMD1, e potenzia l'attività chaperon di CCS verso SOD1. Riferimenti correlati: PMID:14685266 PMID:20154138
• Agisce come regolatore positivo della segnalazione Wnt ubiquitinando i corepressori trascrizionali TLE (TLE1-4) e AES, il che allevia la repressione sulla trascrizione mediata da TCF/LEF e permette la formazione del complesso beta-catenina/TCF4. Riferimenti correlati: PMID:22304967
• Sopprime la formazione del ripoptosoma ubiquitinando RIPK1 e CASP8, proteggendo così le cellule dalla morte cellulare necroptotica dipendente e indipendente dalle caspasi. Riferimenti correlati: PMID:22095281
• Espresso in modo ubiquitario nei tessuti, ma assente nei leucociti del sangue periferico; rilevato a livello proteico nelle cripte del colon. Riferimenti correlati: PMID:8654366 PMID:30389919
• Localizza a livello subcellulare sia nel citoplasma che nel nucleo, in linea con i suoi molteplici ruoli funzionali nell'apoptosi, nella segnalazione e nella trascrizione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 1-200 di XIAP umano) copre la regione N-terminale contenente i domini BIR. Questa regione è critica per l'interazione di XIAP con le caspasi e altri partner di legame; pertanto, l'anticorpo può riconoscere epitopi essenziali per studi funzionali.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda a circa 57 kDa in base al peso molecolare previsto di XIAP. Tuttavia, a causa di potenziali modificazioni post-traduzionali (es. fosforilazione, ubiquitinazione) o prodotti di clivaggio, potrebbero essere osservate bande aggiuntive; convalidare nel vostro sistema campione.
• Il produttore riporta che questo anticorpo reagisce con XIAP umano, di topo e di ratto. Per applicazioni cross-specie (es. campioni di topo o ratto), verificare la reattività e la specificità nelle vostre condizioni sperimentali.
• L'anticorpo è convalidato KO, indicando un'alta probabilità di specificità. Tuttavia, includere controlli positivi e negativi appropriati (es. lisati knockout per XIAP) nei vostri saggi.
• Per l'ELISA, ottimizzare la concentrazione dell'antigene di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo; l'immunogeno è una proteina ricombinante, quindi considerare l'uso di una proteina ricombinante simile come controllo positivo.

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