Anticorpo monoclonale Anti-XPD/ERCC2 per WB, IHC-P, ELISA - P18074

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di XPD/ERCC2

• La proteina XPD/ERCC2 è un'elicasi DNA dipendente da ATP 5'-3' che è un componente centrale del fattore generale di trascrizione e riparazione del DNA IIH (complesso TFIIH), svolgendo un ruolo critico nella riparazione per escissione di nucleotidi (NER) e nell'inizio della trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:31253769, PMID:8413672, PMID:9771713
• Nella NER accoppiata alla trascrizione, XPD/ERCC2 riconosce le basi del DNA danneggiate e viene sequestrata nella cromatina sul DNA danneggiato dai raggi UV; l'attività elicasica dipendente da ATP è essenziale per l'apertura del DNA intorno alla lesione. Riferimenti correlati: PMID:17466626, PMID:23352696, PMID:9771713
• Durante l'inizio della trascrizione da parte dell'RNA polimerasi II, XPD/ERCC2 agisce come un ponte strutturale tra il modulo chinasi attivatrice di CDK (CAK) e il complesso core-TFIIH, e la sua attività elicasica è necessaria per l'apertura e la fuoriuscita dal promotore; si verificano ampi cambiamenti conformazionali tra i complessi di NER e quelli di trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:10024882, PMID:31253769, PMID:33902107, PMID:17466626
• Oltre ai suoi ruoli nella riparazione del DNA e nella trascrizione, XPD/ERCC2 partecipa alla segregazione cromosomica come parte del complesso MMXD associato al fuso mitotico e regola l'attività del recettore della vitamina D.
• La localizzazione subcellulare include il nucleo, il citoplasma e il citoscheletro (fuso), coerente con i suoi ruoli nella trascrizione, riparazione del DNA e mitosi.
• XPD/ERCC2 contiene un cluster ferro-zolfo 4Fe-4S e un dominio di legame per l'ATP; le mutazioni sono associate a fenotipi di Xeroderma pigmentosum, sindrome di Cockayne e tricotiodistrofia.
• Lo splicing alternativo produce più isoforme e la proteina è soggetta a coniugazione con ubiquitina.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una sequenza all'interno degli amminoacidi 600-700 di XPD/ERCC2 umano; considerare che questa regione potrebbe essere conservata tra le specie, contribuendo all'osservata reattività incrociata con topo e ratto.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda a circa 87kDa; convalidare la banda specifica confrontandola con marcatori di peso molecolare noti e utilizzando controlli appropriati.
• Nell'immunoistochimica su sezioni incluse in paraffina (IHC-P), potrebbero essere necessari protocolli di recupero dell'antigene per una rilevazione ottimale; si consiglia un test pilota con tessuti di controllo.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per catturare o rilevare peptidi o proteine ricombinanti di XPD/ERCC2; si consiglia l'ottimizzazione della concentrazione di rivestimento e del formato di rilevazione.

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