Anticorpo policlonale di coniglio anti-YAP1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P46937

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di YAP1

• Coattivatore e corepressore trascrizionale che funge da effettore a valle critico della via di segnalazione Hippo, controllando le dimensioni degli organi, la proliferazione e l'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:17974916 PMID:18280240 PMID:18579750
• Nella via Hippo, le chinasi MST1/2 fosforilano LATS1/2, che a loro volta fosforilano YAP1 in più siti, impedendone la traslocazione nucleare e favorendone la ritenzione citoplasmatica. Riferimenti correlati: PMID:18158288 PMID:26598551 PMID:34404733
• YAP1 nucleare interagisce con i fattori di trascrizione TEAD per indurre l'espressione di geni coinvolti nella crescita cellulare, nella crescita indipendente dall'ancoraggio e nella transizione epiteliale-mesenchimale (EMT). Riferimenti correlati: PMID:18579750
• Regola la tensione tissutale e la forma 3D dei tessuti modulando la rete di actomiosina corticale attraverso ARHGAP18, una proteina attivante la GTPasi Rho che sopprime la polimerizzazione dell'actina F. Riferimenti correlati: PMID:25778702
• Agisce come corepressore trascrizionale di TEAD4 per sopprimere la ciliogenesi reprimendo l'espressione di AURKA e PLK1. Riferimenti correlati: PMID:25849865
• Si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nelle giunzioni strette e nella membrana cellulare; si sposta tra i comparti in risposta alla fosforilazione e alla densità cellulare.
• È sovraespresso in alcuni tumori del fegato e della prostata; le isoforme prive del dominio di transattivazione si trovano nei neuroni striatali dei pazienti affetti da malattia di Huntington.
• È modificato post-traduzionalmente tramite fosforilazione, ubiquitinazione e splicing alternativo; funziona sia come attivatore che come repressore ed è classificato come proto-oncogene.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno (residui 155–504) copre più domini regolatori, inclusi i motivi di legame TEAD e porzioni del dominio di transattivazione; l'anticorpo può riconoscere YAP1 full-length e alcune isoforme di splicing.
• Per Western blot ci si aspetta una banda predominante vicino a 54 kDa; tuttavia, possono comparire bande aggiuntive a causa di fosforilazione, ubiquitinazione o variazione delle isoforme.
• Convalidare la specificità dell'anticorpo nel proprio sistema modello utilizzando il knockdown siRNA o i modulatori della via Hippo (ad esempio, la deprivazione di siero per indurre la fosforilazione di YAP1 e la ritenzione citoplasmatica).
• Per l'immunofluorescenza, si ricorda che la localizzazione di YAP1 dipende dalla densità cellulare; in condizioni di bassa densità è nucleare, mentre in condizioni di alta confluenza diventa citoplasmatica.
• Ottimizzare il recupero dell'antigene per IHC-P e includere controlli appropriati (ad esempio, tessuti noti per sovraesprimere YAP1, come alcuni carcinomi).

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