Anticorpo monoclonale coniglio Anti-YKL-40/CHI3L1 per WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - P36222

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di YKL-40/CHI3L1

• YKL-40/CHI3L1 è una glicoproteina secreta di 39-43 kDa appartenente alla famiglia delle glicosil idrolasi 18; lega la chitina con elevata affinità ma non possiede attività catalitica chitinasica.
• Svolge un ruolo fondamentale nel rimodellamento tissutale e aiuta le cellule a rispondere e adattarsi ai cambiamenti ambientali, in particolare nel contesto dell'infiammazione cronica e della riparazione tissutale.
• Agisce come mediatore chiave nella risposta infiammatoria dei linfociti T helper di tipo 2 (Th2) e nell'infiammazione indotta da IL-13, regolando la sensibilizzazione agli allergeni, l'apoptosi delle cellule infiammatorie, l'accumulo di cellule dendritiche e la differenziazione dei macrofagi M2.
• Facilita l'invasione di batteri enterici patogeni nella mucosa colonica e negli organi linfoidi, attivando la segnalazione di AKT1 e la conseguente produzione di IL-8 nelle cellule epiteliali del colon.
• Nel polmone contribuisce all'eliminazione batterica mediata dai macrofagi, controlla la diffusione dei patogeni e aumenta la tolleranza dell'ospite alle infezioni; regola inoltre il danno indotto da iperossia, l'infiammazione e l'apoptosi epiteliale.
• Subcellularmente, è secreta nello spazio extracellulare, ma si trova anche nel citoplasma, nella regione perinucleare e nel reticolo endoplasmatico.
• L'espressione è fortemente limitata a macrofagi attivati, condrociti articolari, cellule sinoviali e fegato, con livelli molto bassi o non rilevabili nel colon non infiammatorio, tessuti muscolari, polmone, pancreas, cellule mononucleate o fibroblasti.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione e formazione di legami disolfuro; parole chiave associate e legami con patologie comprendono antimicrobico, apoptosi, asma e schizofrenia.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide C-terminale (aa 284–383), che può riconoscere sia la forma full-length che quella clivata di YKL-40. Per Western blot è prevista una banda intorno ai 43 kDa, ma tenere conto che la glicosilazione può causare lievi spostamenti di mobilità.
• Convalidare l'anticorpo su campioni di controllo positivi noti per esprimere YKL-40, come macrofagi attivati, sinovia infiammata o tessuto epatico. Includere appropriati controlli negativi (es. colon normale o fibroblasti) dove l'espressione è bassa.
• Per le applicazioni di immunofluorescenza, ricordare che la proteina può localizzarsi nel citoplasma, nell'area perinucleare e nelle vescicole secretorie; la permeabilizzazione è necessaria per la rilevazione intracellulare.
• In ELISA, l'abbinamento di questo anticorpo con un partner di cattura/rilevazione richiede un'ottimizzazione interna; testare su YKL-40 ricombinante o proteina naturale in terreno di coltura condizionato.
• La reattività crociata con topo e ratto è riportata, ma l'intensità del segnale può variare. Verificare la reattività specifica per specie e titolare le concentrazioni di anticorpo di conseguenza per ogni applicazione.

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