Anticorpo monoclonale di coniglio anti-YOD1 (WB, ELISA) - Q5VVQ6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di YOD1

• YOD1 è una tioesterasi dell'ubiquitina appartenente alla famiglia OTU delle deubiquitinasi, nota anche con i nomi alternativi DUBA-8, OTUD2 e HIN-7.
• Funziona come idrolasi che rimuove l'ubiquitina coniugata dalle proteine, svolgendo un ruolo fondamentale nella degradazione associata al reticolo endoplasmatico (ERAD) delle proteine mal ripiegate del lume.
• YOD1 può accorciare le catene di ubiquitina sui substrati per facilitarne il passaggio attraverso il poro VCP/p97, poiché le porzioni di ubiquitina possono ostacolare stericamente l'infilamento.
• L'enzima presenta specificità per i legami e scinde le catene di poliubiquitina legate tramite Lys-27, Lys-29, Lys-33 e Lys-11.
• YOD1 è coinvolta nella macroautofagia, in particolare nella rimozione dei lisosomi danneggiati mediante il reclutamento di PLAA, UBXN6 e VCP sulle membrane lisosomiali ubiquitinate su K48. Riferimenti correlati: PMID:27753622
• È localizzata principalmente nel citoplasma e contiene un dominio zinc-finger, classificandosi come proteasi tiolica che lega i metalli.
• Lo splicing alternativo del gene YOD1 produce molteplici isoforme e il suo peso molecolare è di circa 38 kDa.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, si consiglia di testare un intervallo standard di diluizioni dell'anticorpo (ad es. 1:500-1:2000) e di ottimizzare le condizioni utilizzando lisati ottenuti dal proprio sistema cellulare o tissutale che esprima YOD1.
• Poiché l'immunogeno è un peptide del dominio OTU (aa 249-348), confermare la specificità dell'anticorpo includendo controlli con knockout di YOD1 o con knockdown mediante siRNA.
• Le prestazioni dell'ELISA possono richiedere l'ottimizzazione della concentrazione dell'antigene di rivestimento e delle condizioni di incubazione dell'anticorpo; si raccomandano titolazioni preliminari a scacchiera.
• Il peso molecolare previsto di YOD1 è di circa 38 kDa; in condizioni riducenti, è prevista una banda di dimensioni prossime a questo valore su SDS-PAGE, ma modifiche post-traduzionali o isoforme potrebbero alterare la massa apparente.

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