Anticorpo Monoclonale Anti-Ythdc1 (Validato KO) per WB - E9Q5K9

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Ythdc1

• Ythdc1 (proteina contenente il dominio YTH 1) è un lettore nucleare di N6-metiladenosina (m6A), una modifica interna dell'mRNA diffusa, e riconosce e si lega specificamente agli RNA contenenti m6A. Riferimenti correlati: PMID:29262316, PMID:29799838
• Agisce come regolatore chiave dello splicing alternativo; promuove l'inclusione degli esoni reclutando il fattore di splicing SRSF3 sui siti dell'mRNA adiacenti all'm6A, mentre inibisce il salto degli esoni competendo con SRSF10.
• Ythdc1 facilita l'esportazione nucleare degli mRNA modificati con m6A attraverso l'interazione con SRSF3 e il fattore di esportazione NXF1.
• Contribuisce all'omeostasi dell'S-adenosil-L-metionina regolando l'espressione di MAT2A, probabilmente attraverso il legame con trascritti MAT2A metilati m6A. Riferimenti correlati: PMID:29262316
• Ythdc1 è essenziale per lo sviluppo della linea germinale: è richiesto per lo sviluppo delle spermatogonie nei maschi e per la crescita e la maturazione degli ovociti nelle femmine, almeno in parte grazie al suo ruolo nello splicing alternativo. Riferimenti correlati: PMID:29799838
• Indipendentemente dalla sua attività di lettore m6A, Ythdc1 protegge il fattore di trascrizione PPARG dalla degradazione proteasomiale mediata dall'ubiquitina impedendo la sua interazione con la ligasi E3 ARIH2, supportando così lo sviluppo del tessuto adiposo bruno e l'omeostasi energetica. Riferimenti correlati: PMID:40355558
• Ythdc1 è localizzato prevalentemente nel nucleo e si concentra negli speckles nucleari, coerentemente con le sue funzioni nella elaborazione e nello splicing dell'mRNA.
• Ulteriori funzioni riportate includono il legame dell'm6A sull'RNA Xist per promuovere l'inattivazione del cromosoma X e il riconoscimento dell'm6A sul DNA a filamento singolo; la proteina è anche soggetta a fosforilazione e modificazioni simili all'ubiquitina.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo mira alla regione C-terminale (aa 597–736) di Ythdc1 di topo, che è altamente conservata nello YTHDC1 umano; è prevista la reattività crociata con campioni umani.
• Per il Western blotting, utilizzare SDS-PAGE standard e trasferimento su membrana PVDF in condizioni riducenti. Dovrebbe essere osservata una banda vicino a 85 kDa; le modificazioni post-traduzionali possono causare lievi spostamenti.
• Essendo un anticorpo validato KO, si consiglia di includere appropriati lisati di cellule o tessuti knockout come controlli negativi per confermare la specificità.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'utilizzo dell'immunogeno proteico ricombinante per l'impostazione e l'ottimizzazione del saggio.
• Data la conservazione della sequenza, il rilevamento nei sistemi umani potrebbe richiedere la regolazione della diluizione dell'anticorpo e delle condizioni di incubazione.

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