Anticorpo policlonale anti-YTHDF1 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q9BYJ9

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di YTHDF1

• YTHDF1 è una proteina citoplasmatica che riconosce m6A, nota anche come DACA-1, codificata dal gene YTHDF1 (C20orf21).
• Si lega specificamente agli mRNA modificati con N6-metiladenosina (m6A) e ne regola la stabilità promuovendone la degradazione tramite il complesso CCR4-NOT. Riferimenti correlati: PMID:24284625, PMID:26318451, PMID:32492408
• YTHDF1 agisce in modo ridondante con i paraloghi YTHDF2 e YTHDF3 nel mediare la degradazione degli mRNA dipendente da m6A e la differenziazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:28106072, PMID:32492408
• Si localizza nel citoplasma, nei P-body e nei granuli da stress; il legame con m6A induce la separazione di fase liquido-liquido, favorendo la formazione di compartimenti privi di membrana. Riferimenti correlati: PMID:31292544, PMID:31388144, PMID:32451507
• Le funzioni specifiche dei tessuti includono il supporto all'apprendimento e alla memoria ippocampali, la regolazione della guida assonale e l'azione come regolatore negativo della presentazione crociata degli antigeni nelle cellule dendritiche.
• La proteina è soggetta ad acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, come indicato dalle parole chiave di UniProt.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la regione N-terminale (aa 1-200); verificare la specificità nel proprio sistema modello, poiché la reattività può dipendere dalla conformazione della proteina.
• Per il WB, il peso molecolare previsto è di circa 61 kDa; utilizzare una percentuale di gel appropriata e lisati di controllo provenienti da cellule umane, murine o di ratto.
• Per IF/ICC, valutare le condizioni di fissazione/permeabilizzazione per rilevare sia la localizzazione citoplasmatica diffusa sia quella granulare.
• Per l'IP, includere un trattamento con RNasi qualora vi sia preoccupazione per interazioni dipendenti dall'RNA.
• Può verificarsi reattività crociata con i paraloghi (YTHDF2, YTHDF3) a causa della similarità di sequenza; considerare una validazione specifica per isoforma.
• Includere sempre controlli positivi e negativi per l'ottimizzazione specifica dell'applicazione.

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