Anticorpo policlonale di coniglio anti-YTHDF2 per WB, IHC, IF - Q9Y5A9

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di YTHDF2

• YTHDF2 è una proteina "reader" dell'N6-metiladenosina (m6A) che si lega specificamente agli RNA contenenti m6A e ne regola la stabilità. Riferimenti correlati: PMID:24284625, PMID:26046440, PMID:26318451
• Promuove la degradazione degli mRNA metilati (m6A) tramite deadenilazione CCR4-NOT o scissione endoribonucleolitica da parte di RNasi P/MRP, a seconda del contesto molecolare. Riferimenti correlati: PMID:27558897, PMID:30930054
• I paraloghi YTHDF (YTHDF1, YTHDF2, YTHDF3) condividono gli mRNA target e agiscono in modo ridondante nella degradazione dell'mRNA e nel differenziamento cellulare. Riferimenti correlati: PMID:28106072, PMID:32492408
• A livello subcellulare, YTHDF2 si localizza nel citosol, nei P-bodies, nei granuli di stress e nel nucleo, e subisce una separazione di fase liquido-liquido per formare compartimenti privi di membrana. Riferimenti correlati: PMID:31292544, PMID:31388144, PMID:31642031
• Altamente espresso nelle cellule staminali pluripotenti indotte (iPSC) e sottoregolato durante il differenziamento neurale, inibisce la specificazione neurale promuovendo la degradazione di mRNA neurali specifici metilati. Riferimenti correlati: PMID:32169943
• YTHDF2 regola anche il metabolismo lipidico epatico circadiano, l'immunità antivirale innata, l'ingresso in mitosi e la spermatogenesi attraverso il decadimento dell'mRNA dipendente da m6A. Riferimenti correlati: PMID:30428350, PMID:30559377, PMID:32267835
• Durante l'infezione virale, YTHDF2 può promuovere l'espressione genica e la replicazione di SV40 e KSHV legandosi agli RNA virali modificati con m6A. Riferimenti correlati: PMID:29447282, PMID:29659627

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1–200) dello YTHDF2 umano; considerare questa posizione dell'epitopo quando si progettano saggi multiplex o quando si utilizzano standard proteici troncati.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 62 kDa; includere lisati di controllo positivo appropriati (es. HeLa, HEK293T) e ottimizzare il caricamento proteico per una rilevazione chiara.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC, IF-P), fissare e permeabilizzare le cellule in base alla localizzazione citosolica e granulare del target; convalidare i pattern di colorazione in linee cellulari note come positive e negative.
• Per l'immunoistochimica su sezioni in paraffina (IHC-P), testare le condizioni di recupero dell'antigene (es. tampone citrato pH 6.0 o EDTA pH 9.0) e titolare l'anticorpo per ridurre il background.
• L'anticorpo reagisce in modo crociato con YTHDF2 di topo e ratto, consentendo studi traslazionali in modelli roditori; confermare l'omologia di sequenza se la specificità assoluta è critica.
• Poiché YTHDF2 si lega agli RNA modificati con m6A, considerare il trattamento delle cellule con inibitori della metilazione o RNasi quando si valuta la specificità del segnale in contesti dipendenti dall'RNA.

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