Anticorpo Policlonale Anti-ZAP70 per WB, IF/ICC, ELISA - P43403

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ZAP70

• ZAP70 (Tirosina-chinasi ZAP-70) è una proteina associata alla catena zeta di 70 kDa, nota anche come chinasi tirosinica correlata a Syk, codificata dal gene ZAP70 (SRK).
• Svolge un ruolo essenziale nella risposta immunitaria adattativa regolando la motilità, l'adesione, l'espressione di citochine delle cellule T e lo sviluppo dei timociti. Dopo l'attivazione del TCR, ZAP70 viene reclutata sulle catene CD3 fosforilate tramite motivi ITAM a livello della membrana plasmatica. Riferimenti correlati: PMID:7509083
• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica, con traslocazione alla membrana cellulare dopo l'attivazione del TCR.
• L'espressione tissutale è limitata a cellule T, cellule natural killer, timociti precoci e cellule pro/pre B.
• Contiene domini SH2 tandem N-terminali e un dominio chinasico C-terminale; subisce fosforilazione su più residui di tirosina e acetilazione.
• È anche necessaria per l'internalizzazione e la degradazione del TCR attraverso l'interazione con ligasi E3 dell'ubiquitina, modulando così lo spegnimento dell'attivazione delle cellule T.
• Contribuisce allo sviluppo e all'attivazione primaria dei linfociti B attraverso la segnalazione del recettore delle cellule B.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1-300 di ZAP70 umano (regione N-terminale), comprendendo i domini SH2; la reattività contro isoforme più corte o varianti di splicing dovrebbe essere verificata sperimentalmente.
• Per il Western blot, considerare l'uso di lisati cellulari totali da Jurkat o PBMC umane; lisati di splenociti di topo o ratto possono essere adatti data la reattività crociata riportata.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, convalidare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione nel sistema campione rilevante, poiché la proteina può essere citosolica o associata alla membrana.
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e della diluizione dell'anticorpo; l'inclusione di un passaggio di blocco con proteina ZAP70 ricombinante potrebbe aiutare a valutare la specificità.

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