Anticorpo monoclonale rabbit Anti-ZBP1 per WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q9H171

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ZBP1

• ZBP1 (proteina legante Z-DNA 1), noto anche come DAI (attivatore dipendente dal DNA dei fattori regolatori dell'IFN) e DLM-1, è un sensore immunitario innato da 46kDa che riconosce specificamente gli acidi nucleici in conformazione Z, in particolare le strutture di Z-RNA prodotte durante l'infezione virale.
• Funge da mediatore chiave della PANoptosi (piroptosi, apoptosi, necroptosi), una via integrata di morte cellulare che difende dai patogeni. Attiva RIPK3, caspase-8 e l'inflammasoma NLRP3 per orchestrare la morte cellulare infiammatoria. Riferimenti correlati: PMID:32200799
• Agisce come attivatore critico della necroptosi: dopo il legame con lo Z-RNA, ZBP1 interagisce e stimola RIPK3, che fosforila MLKL, innescando l'esecuzione della necrosi programmata.
• Durante l'infezione da virus dell'influenza A (IAV), ZBP1 guida la necroptosi nucleare rilevando lo Z-RNA nel nucleo, portando all'attivazione di RIPK3-MLKL, alla rottura dell'involucro nucleare e alla fuoriuscita di DNA cellulare nel citosol. Riferimenti correlati: PMID:32200799
• Componente del complesso AIM2 PANoptosoma che innesca la PANoptosi in risposta all'infezione batterica; funge anche da sensore apicale dell'infezione fungina che attiva la PANoptosi.
• In alcuni tipi cellulari, ZBP1 limita la replicazione virale tramite meccanismi indipendenti dalla morte cellulare. Ad esempio, nei neuroni infettati dal virus Zika, ZBP1-RIPK3 sovraregolano l'enzima ACOD1/IRG1, producendo il metabolita itaconato che sopprime la replicazione del genoma virale.
• La localizzazione subcellulare comprende sia il citoplasma che il nucleo, coerente con il suo ruolo di rilevamento dell'RNA virale citosolico e dello Z-RNA nucleare durante l'infezione da orthomixovirus.
• È altamente espresso nei tessuti linfatici (linfonodi, leucociti, tonsille, midollo osseo, milza); è rilevabile anche nel timo, nel polmone e nel fegato. Riferimenti correlati: PMID:11842111

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre la regione N-terminale (amminoacidi 1–170) che contiene i domini di legame al DNA Zα e Zβ, consentendo probabilmente il riconoscimento di ZBP1 a lunghezza completa e di alcune varianti di splicing. Verificare la reattività con il sistema di campionamento pertinente.
• Per il western blotting (WB), il peso molecolare previsto è di circa 46 kDa; gli utenti dovrebbero considerare l'uso di controlli positivi come linee cellulari immunitarie infettate da virus o stimolate (ad esempio THP-1, U937) per confermare la specificità.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), le condizioni di fissazione e permeabilizzazione devono essere ottimizzate, poiché ZBP1 può localizzarsi sia nel citoplasma che nel nucleo a seconda dello stato di attivazione.
• Per le applicazioni di immunoprecipitazione (IP) e ELISA, validare le prestazioni dell'anticorpo in condizioni non denaturanti e considerare la crosslinking su supporti solidi se necessario.
• Poiché questo anticorpo è validato per la specie umana, la reattività incrociata con ZBP1 di topo o ratto non è garantita; gli utenti che necessitano di reattività con altre specie devono valutarlo in modo indipendente.

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