Anticorpo Policlonale Anti-ZFYVE9 per WB e ELISA - O95405

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ZFYVE9

• ZFYVE9 (Proteina contenente il dominio FYVE con dito di zinco 9), nota anche come SARA (Smad anchor for receptor activation), è una proteina adattatrice dell'endosoma precoce che appartiene alla famiglia contenente il dominio FYVE.
• Funziona principalmente nella via di segnalazione TGF-β reclutando SMAD2 e SMAD3 al recettore TGF-β sulla membrana dell'endosoma precoce, facilitandone la fosforilazione e la successiva traslocazione nucleare.
• La proteina modula l'attività trascrizionale del complesso SMAD3/SMAD4, regolando così l'espressione genica a valle in risposta alla stimolazione del TGF-β.
• ZFYVE9 potrebbe anche essere coinvolta nell'internalizzazione del recettore TGF-β, contribuendo all'attenuazione del segnale e al traffico recettoriale.
• Subcellularmente, ZFYVE9 è localizzata nel citoplasma e specificamente sul lato citoplasmatico della membrana dell'endosoma precoce, dove il suo dominio FYVE lega il fosfatidilinositolo 3-fosfato.
• L'espressione è ubiquitaria, ma nel cervello si trova prevalentemente nelle cellule della muscolatura liscia cerebrovascolare e negli astrociti reattivi, suggerendo ruoli tessuto-specifici.
• La proteina subisce splicing alternativo ed è classificata come fosfoproteina, con un dominio zinc-finger che media la coordinazione degli ioni metallici, essenziale per la sua localizzazione endosomiale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo corrisponde ai 260 amminoacidi N-terminali; questa regione potrebbe essere meno conservata tra le varianti di splicing, quindi convalidare il rilevamento della vostra isoforma target in lisati cellulari rilevanti.
• Per il Western blotting, ci si aspetta una banda vicina a 156 kDa; utilizzare una percentuale di gel e condizioni di trasferimento appropriate per proteine ad alto peso molecolare e includere un controllo positivo come lisato cellulare HeLa o HEK293.
• In ELISA, rivestire con proteina ZFYVE9 ricombinante o un peptide della sequenza immunogena; titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale e confermare la specificità con un pozzetto non rivestito.
• Essendo un anticorpo policlonale, potrebbe riconoscere più epitopi; considerare di testare la consistenza lotto per lotto se utilizzato per saggi quantitativi e includere sempre controlli appropriati.

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