Anticorpo policlonale di coniglio anti-ZNF598 per WB ed ELISA - Q86UK7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ZNF598

• ZNF598 (noto anche come proteina 598 con dita di zinco) è una ligasi E3 dell'ubiquitina-proteina che funge da sensore delle collisioni ribosomiali nella via di controllo qualità dei ribosomi (RQC), riconoscendo i diribosomi entrati in collisione e inducendo l'arresto della traduzione. Riferimenti correlati: PMID:28065601 PMID:28132843 PMID:28685749
• In seguito al riconoscimento del ribosoma bloccato, ZNF598 catalizza la monoubiquitinazione delle proteine ribosomiali 40S RPS10/eS10 e RPS3/uS3, nonché la poliubiquitinazione di RPS20/uS10 legata tramite 'Lys-63', facilitando il reclutamento del complesso RQT per la disassemblazione del ribosoma. Riferimenti correlati: PMID:28065601 PMID:28132843 PMID:28685749 PMID:32099016 PMID:32579943 PMID:36302773
• L'attività della ligasi E3 dell'ubiquitina di ZNF598 dipende dall'enzima E2 coniugante l'ubiquitina UBE2D3 e la proteina viene attivata specificamente durante la traduzione di mRNA prematuramente poliadenilati. Riferimenti correlati: PMID:28065601 PMID:28132843 PMID:28685749
• Indipendentemente dalla sua funzione nell'RQC, ZNF598 agisce come adattatore che recluta il complesso 4EHP-GYF2 sugli mRNA e regola negativamente l'espressione dei geni stimolati dall'interferone (ISG). Riferimenti correlati: PMID:22751931 PMID:32726578 PMID:29719242
• Durante l'infezione da poxvirus, ZNF598 è necessaria per la sintesi delle proteine virali mediando l'ubiquitinazione di RPS10/eS10 e RPS20/uS10, probabilmente aumentando l'efficienza della traduzione su leader 5' poli(A) insoliti. Riferimenti correlati: PMID:29719242
• ZNF598 agisce inoltre come regolatore positivo della stabilità di Tat dell'HIV-1, riducendo l'ubiquitinazione legata tramite 'Lys-48' e la degradazione proteasomiale di Tat, favorendo così la replicazione virale e la riattivazione della latenza.
• A livello subcellulare, ZNF598 è localizzata nel citoplasma e nel citosol e presenta molteplici domini a dita di zinco, un motivo di fosfoproteina e splicing alternativo (UniProt Q86UK7).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato comprende gli amminoacidi 120–420 di ZNF598 umano, coprendo i domini centrali a dita di zinco; si prevede che questa regione generi anticorpi in grado di riconoscere sia la proteina a lunghezza completa sia le potenziali isoforme derivanti da splicing alternativo.
• Per l'analisi Western blot, cercare bande target vicine al peso molecolare previsto di circa 99 kDa; bande aggiuntive possono derivare da modifiche post-traduzionali o varianti di isoforma: verificarne la specificità con controlli appropriati.
• Nelle applicazioni ELISA, considerare l'ottimizzazione dell'antigene di rivestimento e della diluizione dell'anticorpo per tenere conto della natura policlonale; la reattività crociata con altre specie potrebbe essere minima a causa dell'omologia limitata al di fuori dell'uomo.
• Dato il ruolo di ZNF598 nell'arresto dei ribosomi e nella replicazione virale, i saggi funzionali (ad esempio, la marcatura con puromicina o i modelli di infezione virale) possono integrare il rilevamento basato sugli anticorpi, ma richiedono un'attenta validazione biologica.

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