Anticorpo policlonale di coniglio Anti-ZO-1 per WB, IF-P, ELISA - Q07157

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di ZO-1

• ZO-1 (Tight junction protein 1) è una proteina di scaffolding appartenente alla famiglia TJP, che comprende TJP2 e TJP3, che collega le proteine transmembrana delle giunzioni strette (claudine, molecole di adesione giunzionali, occludina) al citoscheletro di actina.
  Riferimenti bibliografici: PMID:7798316 PMID:9792688
• La proteina forma condensati a più fili che si allungano nella cintura delle giunzioni strette, ancorati apicalmente tramite interazione con PATJ, essenziali per la polarizzazione epiteliale, la formazione della barriera e la lumenogenesi.
• ZO-1 svolge un ruolo regolatorio nella migrazione cellulare indirizzando CDC42BPB al bordo d'avanguardia, ed è importante per la formazione dei podosomi, regolando l'adesione cellulare e il rimodellamento della matrice.
  Riferimenti bibliografici: PMID:21240187 PMID:20930113
• Insieme a TJP2 e TJP3, partecipa alla ritenzione giunzionale e alla stabilità del fattore di trascrizione DBPA, anche se non è coinvolto nel suo shuttling nucleare.
• ZO-1 si localizza sulle membrane cellulari a livello delle giunzioni strette, delle giunzioni comunicanti e dei podosomi (proiezioni cellulari).
• Espressione tessuto-specifica: l'isoforma contenente l'alfa si trova nella maggior parte delle giunzioni epiteliali, mentre l'isoforma corta è rilevata nelle cellule endoteliali e nelle giunzioni epiteliali specializzate dei glomeruli renali e delle cellule di Sertoli.
• ZO-1 contiene più domini di interazione proteica, tra cui domini PDZ, SH3 e simili alla guanilato chinasi, ed è regolato da fosforilazione e splicing alternativo.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno bersaglia gli amminoacidi 18–273 di ZO-1 umano (regione N-terminale, che comprende i domini PDZ). Si consiglia di convalidare la specificità con controlli di knockout o knockdown.
• Per Western blot, aspettarsi una banda a ~195 kDa. Utilizzare una percentuale di gel appropriata (ad esempio, 6–8%) e ottimizzare le condizioni di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare.
• Nell'immunofluorescenza su sezioni incluse in paraffina (IF-P), ottimizzare il recupero dell'antigene; verificare la localizzazione a livello delle giunzioni strette o delle regioni membranali.
• Questo anticorpo mostra reattività crociata con topo e ratto; è adatto per studi su modelli roditori; tuttavia, confermare il segnale nel tessuto di interesse prima di un utilizzo su larga scala.

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