Anticorpo policlonale di coniglio anti-ZP3 per WB, IF-P, ELISA - P21754

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della ZP3

• La proteina 3 di legame degli spermatozoi della zona pellucida (ZP3, nota anche come ZPC, ZP3A/ZP3B, Zp-3) è una componente glicoproteica principale della zona pellucida, una matrice extracellulare che circonda gli ovociti.
• La ZP3 svolge un ruolo cruciale nella fecondazione: media il legame specie-specifico degli spermatozoi all'ovocita, innesca la reazione acrosomiale e contribuisce a prevenire la polispermia dopo la fecondazione.
• La zona pellucida è generalmente composta da 3 o 4 glicoproteine (ZP1, ZP2, ZP3, ZP4), con la ZP3 essenziale sia per l'interazione con gli spermatozoi sia per l'assemblaggio della matrice della zona.
• La ZP3 è localizzata principalmente nella matrice della zona pellucida ed è inoltre associata alla membrana cellulare dell'ovocita.
• La proteina subisce modificazioni post-traduzionali, tra cui glicosilazione, formazione di ponti disolfuro e scissione in corrispondenza di residui basici, importanti per i suoi ruoli strutturali e funzionali.
• L'espressione tissutale è limitata agli ovociti, come confermato a livello proteico.
• Lo splicing alternativo produce molteplici isoforme (ZP3A e ZP3B) e le mutazioni nella ZP3 sono associate all'infertilità e a varianti patologiche.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo è un peptide sintetico derivato da una sequenza situata nella regione centrale (aa 246-345) della ZP3 umana. I ricercatori dovrebbero prendere in considerazione la verifica della specificità dell'epitopo nel proprio sistema modello, in particolare quando studiano isoforme della ZP3 o la reattività tra specie diverse.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda intorno a 47 kDa (peso molecolare previsto di circa 47 kDa). Tuttavia, a causa della glicosilazione, il peso molecolare osservato può differire; se è necessaria una determinazione precisa del peso molecolare, si consiglia di utilizzare enzimi di deglicosilazione.
• Nell'immunofluorescenza (IF-P), la ZP3 si localizza tipicamente nella zona pellucida e nella membrana dell'ovocita; è necessario garantire protocolli appropriati di fissazione e permeabilizzazione per rilevare questa proteina associata alla matrice extracellulare.
• Secondo i dati del fornitore, l'anticorpo presenta reattività crociata con la ZP3 umana, murina e di ratto, ma si raccomanda di validarlo nel tessuto o nel tipo cellulare specifico prima di procedere con esperimenti su larga scala.

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