Anticorpo Policlonale Anti-ZWINT di Coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - O95229

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ZWINT

• ZWINT, noto anche come SIP30, ZWINT1, KNTC2AP, HZwint-1, è un componente del complesso KNL1 del cinetocoro esterno che funge da punto di ancoraggio per i componenti del checkpoint dell'assemblaggio del fuso e media le interazioni microtubulo-cinetocoro. Riferimenti correlati: PMID:15094189 PMID:15485811 PMID:15824131
• È una subunità della rete KMN (complessi MIS12, NDC80, KNL1) che costituisce il cinetocoro esterno, connettendo il DNA centromerico ai microtubuli del fuso e reclutando proteine del checkpoint mitotico. Riferimenti correlati: PMID:15094189 PMID:15485811 PMID:15824131
• ZWINT indirizza il complesso RZZ al cinetocoro in prometafase (PubMed:15485811) e recluta MAD2L1 (per similarità), contribuendo all'attivazione del checkpoint dell'assemblaggio del fuso. Riferimenti correlati: PMID:15485811
• Oltre alla mitosi, ZWINT è essenziale per l'allineamento dei cromosomi omologhi durante la metafase I meiotica e attiva il checkpoint dell'assemblaggio del fuso ai cinetocori non attaccati in meiosi I. Riferimenti correlati: PMID:15485811
• A livello subcellulare, ZWINT si localizza nel nucleo, specificamente nella regione centromero-cinetocoro dei cromosomi, in linea con il suo ruolo nella segregazione cromosomica.
• La proteina contiene un dominio a spirale avvolta (coiled coil), è soggetta a splicing alternativo e la sua struttura 3D è stata parzialmente risolta (UniProt Keywords).
• In quanto componente chiave del cinetocoro, ZWINT è implicato nella regolazione del ciclo cellulare, nella mitosi e nella biologia cromosomica, come evidenziato dalla sua identificazione in studi di proteomica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 1–277 di ZWINT umano (NP_008988.2), corrispondente alla regione N-terminale che include domini funzionali. Considerare l'uso di questo anticorpo per rilevare le isoforme a lunghezza intera e quelle derivanti da splicing alternativo.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di ~31 kDa. Includere lisati di controllo positivo appropriati da cellule mitotiche o tessuti che esprimono ZWINT e validare la dimensione della banda nel proprio sistema sperimentale.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, aspettarsi una colorazione puntiforme del cinetocoro durante la prometafase e la metafase in cellule in divisione. Controcolorare il DNA per visualizzare i cromosomi e confermare la localizzazione.
• Per l'ELISA, ottimizzare la concentrazione dell'antigene di rivestimento e dell'anticorpo utilizzando come standard proteina ZWINT ricombinante o lisati cellulari.
• È stata riportata reattività incrociata con umano, topo e ratto; tuttavia, validare nella specifica specie e nel contesto sperimentale per garantirne la specificità.

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