Anticorpo monoclonale APC Anti-CD25 per citometria a flusso - P01590

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD25

• La subunità alfa del recettore dell'interleuchina-2 (CD25), conosciuta anche come p55, è codificata dal gene Il2ra nei topi ed è un componente chiave del recettore ad alta affinità per l'IL-2, essenziale per l'omeostasi immunitaria corretta.
• CD25 è espresso costitutivamente a livelli elevati sulle cellule T regolatorie (TREG) ed è fondamentale per la loro funzione nel mantenimento della tolleranza immunitaria, sopprimendo l'attivazione e l'espansione dei linfociti T autoreattivi.
• La proteina è una glicoproteina di membrana di tipo I a passaggio singolo, con una regione extracellulare contenente due domini sushi (CCP/SCR) che facilitano il legame con il ligando e la formazione del complesso recettoriale.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la glicosilazione N-linked e la formazione di ponti disolfuro, importanti per il corretto ripiegamento e la stabilità del dominio extracellulare.
• La localizzazione subcellulare è principalmente sulla membrana plasmatica, con una breve coda citoplasmatica coinvolta nella trasduzione del segnale dopo il legame con l'IL-2.
• CD25 è anche upregolato transitoriamente sulle cellule T convenzionali attivate, cellule B e cellule NK, funzionando come marcatore di attivazione precoce.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre il dominio extracellulare (amminoacidi 22-236) del CD25 murino: questo permette di ottenere anticorpi che riconoscono il recettore nativo di superficie, particolarmente adatti per applicazioni in citometria a flusso.
• Per la citometria a flusso, titrare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il tuo specifico tipo cellulare e le tue condizioni sperimentali, utilizzando controlli positivi (ad esempio cellule T attivate) e negativi appropriati.
• La colorazione di superficie può essere eseguita su cellule vive non fissate; evitare la fissazione con reagenti che potrebbero alterare il fluoroforo APC o l'accessibilità all'epitopo, a meno che non sia stata validata.
• Prendere in considerazione la co-colorazione con marcatori come Foxp3 (intracellulare) o CD4 per identificare i sottogruppi di Treg o le cellule T attivate in campioni murini.

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