Anticorpo Monoclonale APC Anti-Umano CD163 per Citometria a Flusso - Q86VB7

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD163

• Il CD163, noto anche come proteina 1 ricca di cisteina di tipo I del recettore spazzino M130 o recettore spazzino dell'emoglobina, è un membro della superfamiglia dei recettori spazzino ricchi di cisteina (SRCR). È codificato dal gene CD163 (Gene ID: 9332) ed esiste in multiple isoforme generate da splicing alternativo. L'isoforma 1 è la meno abbondante nel sangue, mentre l'isoforma 3 è l'isoforma predominante rilevata nel sangue.
• Il recettore svolge un ruolo critico nella clearance mediata dai macrofagi dei complessi emoglobina/aptoglobina, proteggendo i tessuti dai danni ossidativi indotti dall'emoglobina libera. Lega questi complessi in modo dipendente dal calcio e dal pH, con affinità più elevata per i complessi contenenti aptoglobina multimerica (fenotipo HP*1F) rispetto all'aptoglobina dimérica (fenotipo HP*1S).
• Al legame del ligando, il CD163 innesca una segnalazione intracellulare che coinvolge la mobilizzazione del calcio dipendente dalla tirosina chinasi e la produzione di inositolo trifosfato, portando alla secrezione di IL-6 e CSF-1. L'isoforma 3 exhibits la capacità più elevata per l'endocitosi del ligando e l'espressione di superficie.
• Dopo il distacco proteolitico, la forma solubile (sCD163) agisce come mediatore anti-infiammatorio e serve come marcatore diagnostico per l'attivazione dei macrofagi in varie condizioni infiammatorie.
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare come proteina transmembrana di tipo I a passaggio singolo e anche la secrezione come ectodominio solubile dopo la clivaggio.
• Il CD163 è espresso specificamente nei monociti e nei macrofagi tissutali maturi, inclusi le cellule di Kupffer nel fegato, i macrofagi della polpa rossa nella milza, i macrofagi corticali nel timo, i macrofagi residenti del midollo osseo e i macrofagi meningei del sistema nervoso centrale.
• La proteina è glicosilata e contiene domini SRCR multipli, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica. È classificata come proteina di fase acuta ed è implicata nella regolazione delle risposte infiammatorie.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo coniugato con APC è progettato per il rilevamento citofluorimetrico del CD163 umano. Poiché il CD163 è abbondantemente espresso sui monociti e sui macrofagi, considerare strategie di gating che includano queste popolazioni cellulari.
• Per una colorazione ottimale, eseguire una titolazione dell'anticorpo per determinare la concentrazione appropriata. L'APC è un fluorocromo brillante; assicurarsi di impostare correttamente la compensazione, specialmente quando si esegue una colorazione simultanea con altri fluorofori.
• Poiché il CD163 viene rilasciato dalla superficie cellulare, considerare l'utilizzo di un anticorpo anti-CD163 che riconosca il dominio extracellulare per una colorazione superficiale affidabile. L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo è una proteina ricombinante, quindi probabilmente lega la porzione extracellulare.
• Includere controlli di isotipo appropriati e coloranti vitali nel pannello di citometria a flusso per escludere cellule morte o legami non specifici. Validare l'anticorpo nel proprio sistema sperimentale specifico, poiché i livelli di espressione possono variare con l'attivazione cellulare o lo stato della malattia.

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