Anticorpo monoclonale APC Anti-Topo CD163 per Citometria a Flusso - Q2VLH6

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD163

• CD163, noto anche come proteina M130 di tipo scavenger receptor cisteina-ricca di classe 1, è un membro della superfamiglia dei recettori scavenger cisteina-ricchi (SRCR). È espresso principalmente su monociti e macrofagi maturi, inclusi le cellule di Kupffer nel fegato, i macrofagi della polpa rossa nella milza e i macrofagi dei linfonodi mesenterici.
• La proteina svolge un ruolo nella clearance e nell'endocitosi dei complessi emoglobina/aptoglobina (Hb/Hp) da parte dei macrofagi. Questo processo protegge i tessuti dal danno ossidativo causato dall'emoglobina libera e facilita il riciclo del ferro tramite la degradazione dell'eme.
• Il legame di CD163 con i complessi Hb/Hp è dipendente dal calcio e dal pH. Dopo il legame con il ligando, CD163 attiva cascate di segnalazione intracellulari che coinvolgono la mobilizzazione del calcio dipendente dalla tirosina chinasi e la produzione di inositolo trifosfato, portando alla secrezione di IL-6 e CSF-1.
• Una forma solubile (sCD163) è generata tramite scissione dell'ectodominio. Livelli elevati di sCD163 sono associati a condizioni infiammatorie, dove può svolgere un ruolo antinfiammatorio agendo come recettore esca.
• Strutturalmente, CD163 è una proteina transmembrana di tipo I a passaggio singolo, con un peptide segnale, più domini SRCR e una breve coda citoplasmatica. È altamente glicosilata e contiene legami disolfuro, che contribuiscono alla sua stabilità e alle proprietà di legame con il ligando.
• Il gene umano di CD163 si trova sul cromosoma 12p13.31, mentre l'ortologo murino è sul cromosoma 6. La proteina subisce splicing alternativo, producendo varianti con potenziali differenze funzionali.
• CD163 è riconosciuto come marcatore della risposta di fase acuta; la sua espressione è upregolata da stimoli antinfiammatori (es. glucocorticoidi, IL-10) e downregolata da segnali proinfiammatori (es. LPS, TNF-α).

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• Per la citometria a flusso, utilizzare l'anticorpo APC coniugato diretto. Eseguire la titolazione per determinare la concentrazione di lavoro ottimale per il tuo specifico tipo cellulare e le condizioni sperimentali, includere sempre un controllo di isotipo appropriato.
• Questo anticorpo bersaglia gli amminoacidi 39–260 del dominio extracellulare, che è accessibile sulla superficie cellulare. È adatto per la colorazione di cellule vive senza permeabilizzazione.
• Validare la reattività in campioni di tessuto murino rilevanti noti per esprimere CD163, come milza, fegato o linfonodi. La digestione enzimatica può migliorare il recupero di macrofagi per la colorazione.
• Poiché l'espressione di CD163 può essere modulata, se i livelli di espressione sono bassi considerare di trattare le cellule con IL-10 o glucocorticoidi per migliorare la rilevazione in vitro.
• Utilizzare un blocco dei recettori Fc (es. anti-CD16/CD32) prima della colorazione per minimizzare il legame non specifico ai recettori Fc sui macrofagi.

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