Anticorpo monoclonale coniugato APC anti-CD223/LAG-3 di coniglio per citometria a flusso - P18627

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di LAG3

• Codificato dal gene LAG3, la proteina lymphocyte activation gene 3 (nota anche come CD223) è una proteina transmembrana di tipo I della superfamiglia delle immunoglobuline con un peso molecolare di circa 57 kDa.
• Agisce come recettore inibitorio sulle cellule T attivate dall'antigene, trasmettendo segnali negativi dopo il legame con il suo ligando principale MHC classe II sulle cellule presentanti l'antigene o con FGL1, inibendo così la segnalazione del recettore delle cellule T (TCR) e l'attivazione delle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:20421648, PMID:35761082, PMID:7805750, PMID:30580966, PMID:32920841
• Il legame del ligando induce l'ubiquitinazione del motivo KIEELE, esponendo il motivo RRFSALE e promuovendo la formazione di condensati con il componente del TCR CD3E, che interrompe l'associazione CD3E-LCK e blocca l'attivazione del TCR. Riferimenti correlati: PMID:40101708, PMID:40592325
• Regola negativamente la proliferazione, l'attivazione, la funzione effettrice e l'omeostasi sia delle cellule T CD4+ che CD8+, e contribuisce alla funzione soppressiva delle cellule T regolatorie (Treg) nonché alla regolazione delle cellule dendritiche plasmacitoidi. Riferimenti correlati: PMID:20421648, PMID:7805750, PMID:8647185
• La via inibitoria mediata da LAG3 è sfruttata dai tumori per attenuare l'immunità anti-tumorale; il co-blocco di LAG3 e PD-1 inverte l'esaurimento delle cellule T e normalizza la risposta anti-tumorale, fornendo una base razionale per l'immunoterapia del cancro. Riferimenti correlati: PMID:35981087, PMID:40101708
• Può anche fungere da ligando per MHC classe II sulle cellule presentanti l'antigene, promuovendone l'attivazione e guidando le risposte immunitarie Th1.
• Localizzazione subcellulare: principalmente sulla membrana cellulare; esiste anche una forma secreta. Le modifiche post-traduzionali includono ponti disolfuro, glicosilazione e splicing alternativo.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 23-430) di LAG3 umano, suggerendo che l'anticorpo riconosce un epitopo accessibile sulla superficie cellulare; ideale per l'analisi in citometria a flusso di cellule vive.
• Poiché l'anticorpo è direttamente coniugato all'APC, consente una colorazione in un unico passaggio senza un reagente secondario, riducendo il fondo e semplificando il flusso di lavoro.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio tipo cellulare specifico e le condizioni sperimentali. Includere un controllo isotipo appropriato per valutare il legame aspecifico.
• Verificare l'espressione in popolazioni di cellule T attivate o linee cellulari LAG3-positive. La colorazione di superficie potrebbe richiedere cellule fresche, non fissate; se si utilizza la fissazione, verificare la compatibilità con il fluoroforo APC.

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