Anticorpo monoclonale APC mouse anti-umano CD11b per citometria a flusso - P11215

Specifiche e parametri core del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'Integrina alfa-M

• L'Integrina alfa-M (ITGAM/CD11b) si combina con l'integrina beta-2 (ITGB2/CD18) per formare l'eterodimero Mac-1/CR3, mediando le interazioni adesive di monociti, macrofagi e granulociti.
• Agisce come recettore per il frammento iC3b della componente complementare C3, facilitando l'assorbimento di particelle e patogeni ricoperti dal complemento. Riferimenti correlati: PMID:20008295, PMID:9558116
• Riconosce ligandi tra cui fibrinogeno e fattore X, probabilmente tramite il peptide R-G-D, e lega i peptidi P1 e P2 della catena gamma del fibrinogeno.
• Funziona come recettore per ICAM1 sulle cellule endoteliali stimolate, promuovendo l'adesione dei leucociti. Riferimenti correlati: PMID:1980124
• Regola la migrazione dei neutrofili ed è richiesto, in associazione con ITGB2, per l'attivazione dei neutrofili stimolati da TNF mediata da CD177-PRTN3. Riferimenti correlati: PMID:28807980, PMID:21193407
• Nella microglia, si associa a TYROBP/DAP12 per controllare la produzione di ioni superossido, contribuendo all'apoptosi neuronale durante lo sviluppo cerebrale (per similarità).
• Subisce splicing alternativo e contiene caratteristiche tipiche delle integrine, tra cui ripetizioni extracellulari di legame del calcio, legami disolfuro e siti di glicosilazione.
• È espresso prevalentemente nei monociti, granulociti (PubMed:1346576) e neutrofili (PubMed:21193407); localizzato sulla membrana cellulare e nelle zolle membrane. Riferimenti correlati: PMID:1346576, PMID:21193407
• Varianti genetiche di ITGAM sono associate al lupus eritematoso sistemico (SLEB6).

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Questo anticorpo è stato ottenuto contro un peptide sintetico derivato dall'CD11b umano; se è richiesto il legame a un dominio specifico, valutare la mappatura dell'epitopo per confermare il sito di riconoscimento.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo utilizzando popolazioni cellulari umane rilevanti (es. monociti del sangue periferico, granulociti o linee cellulari come THP-1) per determinare la concentrazione di colorazione ottimale.
• Utilizzare reagenti di blocco dei recettori Fc per minimizzare il legame non specifico ai recettori Fcγ espressi sulle cellule mieloidi.
• Includere un controllo di isotipo coniugato APC appropriato ed eseguire controlli di compensazione quando si utilizza in pannelli multicolore.
• Verificare l'espressione del bersaglio mediante co-colorazione con un clone di anticorpo anti-CD11b non competitivo o utilizzando un controllo knockout/knockdown dove possibile.
• Il peso molecolare previsto di ITGAM è di circa 127 kDa; se si adatta questo anticorpo per altre applicazioni (es. Western blot), tenere conto che potrebbe richiedere ottimizzazione.

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