Anticorpo monoclonale murino anti-CD3 umano coniugato APC per citometria a flusso - P07766

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della catena epsilon del CD3

• CD3E (catena epsilon del CD3, alias T3E, TCRE, IMD18) è una subunità del complesso TCR-CD3 espressa sulle cellule T, cruciale per l'immunità adattativa. Riferimenti correlati: PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098

• In seguito al legame del TCR, CD3E, insieme alle altre catene del CD3, trasduce i segnali di attivazione attraverso la membrana tramite i suoi motivi ITAM (immunoreceptor tyrosine-based activation motifs). Riferimenti correlati: PMID:2470098 PMID:40592325

• La fosforilazione degli ITAM da parte di LCK e FYN crea siti di ancoraggio per ZAP70, innescando cascate di segnalazione a valle, incluso il flusso di calcio e le vie MAPK/ERK. Riferimenti correlati: PMID:2470098 PMID:40592325

• CD3E è essenziale per lo sviluppo delle cellule T; partecipa alla selezione e maturazione dei timociti.

• Contiene motivi di endocitosi che mediano l'internalizzazione e la down-regolazione superficiale del complesso TCR-CD3, regolando la durata del segnale. Riferimenti correlati: PMID:10384095 PMID:26507128

• CD3E funge anche da recettore per ITPRIPL1, che inibisce l'attivazione delle cellule T promuovendo l'interazione con NCK1 e bloccando il legame di ZAP70 e la segnalazione NF-kB. Riferimenti correlati: PMID:12110186 PMID:38614099

• A livello subcellulare, CD3E è localizzata sulla membrana cellulare, coerente con il suo ruolo nel riconoscimento del ligando extracellulare e nella trasduzione del segnale.

• È caratterizzata da un peptide segnale, un dominio immunoglobulina, un'elica transmembrana e motivi ITAM citoplasmatici; subisce fosforilazione e formazione di legami disolfuro.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale di colorazione per la propria popolazione cellulare; tipicamente 0,5–5 µg per 1×10⁶ cellule è un punto di partenza.
• Includere appropriati controlli isotipo e controlli fluorescence-minus-one (FMO) per garantire la specificità.
• Il coniugato APC è eccitabile da laser a 633–647 nm; minimizzare l'esposizione alla luce per prevenire lo sbiancamento fotochimico (photobleaching).
• Essendo un anticorpo derivato da proteina ricombinante, riconosce la catena epsilon nativa del CD3; potrebbe essere necessaria fissazione/permeabilizzazione per epitopi intracellulari.
• Questo anticorpo è validato per campioni umani; la reattività incrociata con altre specie non è stata determinata, quindi testare nei sistemi modello rilevanti se necessario.

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