Anticorpo monoclonale APC coniglio anti-Umano CD117/c-Kit per FC - P10721

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit, noto anche come recettore del fattore di crescita dei mastociti/staminali Kit, è un recettore tirosin-chinasi transmembrana codificato dal proto-oncogene KIT. Appartiene alla famiglia dei recettori tirosin-chinasi di tipo III ed è caratterizzato da domini extracellulari simili a immunoglobuline, un'elica transmembrana singola e un dominio chinasi intracellulare diviso.
• La funzione primaria di CD117/c-Kit è quella di servire da recettore di superficie cellulare per il fattore di crescita delle cellule staminali (SCF/KITLG). Al legame del ligando, KIT dimerizza, portando all'autofosforilazione e all'attivazione di molteplici cascate di segnalazione a valle, incluse le vie PI3K/AKT, RAS/MAPK e JAK/STAT.
• Attraverso queste vie, CD117/c-Kit regola processi cellulari essenziali come la sopravvivenza cellulare, la proliferazione, la differenziazione e la migrazione. Gioca un ruolo critico nell'ematopoiesi, nel mantenimento delle cellule staminali, nella gametogenesi, nella melanogenesi e nello sviluppo e nella funzione dei mastociti.
• CD117/c-Kit è localizzato prevalentemente sulla membrana cellulare, ma dopo l'attivazione può essere internalizzato e ritrovato transitoriamente nel citoplasma prima della degradazione o del riciclaggio.
• La proteina subisce diverse modificazioni post-traduzionali, tra cui glicosilazione N-legata, formazione di ponti disolfuro e ubiquitinazione. La fosforilazione indotta dal ligando su molteplici residui tirosina crea siti di ancoraggio per proteine di segnalazione contenenti domini SH2, propagando così il segnale.
• Nel testicolo umano, CD117/c-Kit è espresso nelle spermatogonie e nelle cellule interstiziali di Leydig, ma non nelle cellule di Sertoli o negli spermatociti. La sua espressione persiste negli spermatozoi eiaculati. Riferimenti correlati: PMID:20601678

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo comprende gli amminoacidi 26-520 del CD117/c-Kit umano, che corrispondono al dominio extracellulare. Questa progettazione può conferire specificità per il recettore nativo sulla superficie cellulare.
• Questo anticorpo è coniugato ad APC (alloficocianina) per applicazioni dirette di citometria a flusso. Si consiglia di utilizzare appropriati controlli di compensazione quando si esegue la citometria a flusso multicolore ed evitare l'esposizione prolungata alla luce per preservare la stabilità del fluoroforo.
• Per la citometria a flusso, validare l'anticorpo su linee cellulari umane note per esprimere CD117 (es. HEL, M-07e o cellule primarie del midollo osseo). Includere un appropriato controllo di isotipo per valutare il legame aspecifico.
• La concentrazione ottimale dell'anticorpo deve essere determinata tramite esperimenti di titolazione nel sistema sperimentale pertinente. La fissazione e la permeabilizzazione cellulare possono influenzare il legame di questo anticorpo, quindi valutare la compatibilità se vengono colorati anche bersagli intracellulari.

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