Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD162/PSGL-1 umano coniugato con APC per citometria a flusso - Q14242

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del ligando 1 della glicoproteina P-selectina (CD162/PSGL-1)

• CD162/PSGL-1 è un proteoglicano di tipo SLe(x) che funge da ligando principale per le selectine P, E e L, mediando il rapido rotolamento dei leucociti sull'endotelio vascolare durante l'infiammazione.
• La proteina esiste sotto forma di molteplici isoforme dovute allo splicing alternativo, che può modulare le sue proprietà di legame o la sua espressione.
• È espressa prevalentemente sulla superficie di neutrofili, monociti e della maggior parte dei linfociti, svolgendo un ruolo essenziale nel traffico leucocitario.
• La localizzazione subcellulare è principalmente a livello della membrana plasmatica (membrana; proteina di membrana di tipo I a singolo passaggio).
• PSGL-1 è soggetta a numerose modifiche post-traduzionali, tra cui solfatazione, sialilazione e O-glicosilazione, essenziali per il legame alle selectine; ulteriori modifiche includono fosforilazione, formazione di ponti disolfuro e formazione di acido piroglutammico N-terminale.
• Oltre al suo ruolo nell'adesione cellulare, PSGL-1 funge da recettore per l'enterovirus 71, facilitando l'ingresso virale nelle cellule ospiti.
• La proteina contiene un peptide segnale, un dominio extracellulare simile alla mucina con ripetizioni decameriche, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Poiché l'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 42-295), si prevede che l'anticorpo riconosca la forma transmembrana nativa di CD162/PSGL-1 sulle cellule vive, risultando particolarmente adatto per la citometria a flusso (FC).
• Per le applicazioni in FC, ottimizzare la titolazione dell'anticorpo e considerare l'impiego di controlli isotipici appropriati per garantire la specificità, soprattutto in considerazione del potenziale legame ai recettori Fc sui leucociti.
• Validare l'espressione di CD162 nelle popolazioni cellulari target (ad es. leucociti del sangue periferico, cellule T attivate o linee cellulari appropriate) prima dell'uso, poiché i livelli di espressione possono variare in funzione dello stato di attivazione cellulare.
• Poiché PSGL-1 è una proteina fortemente glicosilata, l'epitopo riconosciuto può dipendere dalla conformazione; le condizioni denaturanti potrebbero influire sul legame dell'anticorpo in applicazioni alternative, come il western blot.
• Il coniugato APC consente il rilevamento diretto della fluorescenza, eliminando la necessità di reagenti secondari; assicurarsi di eseguire una corretta compensazione nei pannelli di citometria a flusso multiparametrica per evitare sovrapposizioni spettrali.

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