Anticorpo monoclonale APC Coniugato, Coniglio anti-Umano CD172a/SIRPα per Citometria a Flusso - P78324

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SIRPα/CD172a

• La tirosina-proteina fosfatasi non recettoriale substrato 1 (SIRPα, nota anche come SHPS-1, CD172a, BIT, MYD-1, p84) è un recettore di superficie cellulare di tipo immunoglobulina che funge da proteina di ancoraggio per PTPN6 e PTPN11, inducendone la traslocazione dal citosol alla membrana plasmatica.
• Funziona come recettore per CD47, mediando la regolazione negativa della fagocitosi, dell'attivazione dei mastociti e dell'attivazione delle cellule dendritiche, e inibendo la maturazione e la produzione di citochine da parte delle cellule dendritiche in seguito al legame con CD47.
• Supporta l'adesione dei neuroni cerebellari, l'estensione dei neuriti e l'attaccamento delle cellule gliali, suggerendo ruoli nella sinaptogenesi e nella funzione sinaptica.
• Agisce come recettore per la trombospondina-1 (THBS1), che stimola la fosforilazione di SIRPA e innesca la produzione di ROS derivata dalla NADPH ossidasi in cellule non fagocitiche. Riferimenti correlati: PMID:24511121
• Esiste in tre isoforme principali (Sirp-alfa-1, -2, -3) a causa di splicing alternativo, con espressione tissutale ubiquitaria ma livelli più alti nel cervello e sulle cellule mieloidi, e assente sui linfociti T.
• Si localizza sulla membrana cellulare come proteina di membrana di tipo I a passaggio singolo, con una regione extracellulare contenente tre domini di tipo immunoglobulina e una coda citoplasmatica con siti di fosforilazione della tirosina.
• Fortemente glicosilata e fosforilata, svolge un ruolo nell'immunità antivirale limitando l'internalizzazione degli arenavirus del Nuovo Mondo.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 31–370, che comprendono l'intero dominio extracellulare; pertanto, si prevede che l'anticorpo riconosca la conformazione nativa di SIRPα sulla superficie cellulare.
• Essendo un anticorpo monoclonale coniugato con APC, è pronto per la colorazione diretta in immunofluorescenza nella citometria a flusso senza la necessità di un reagente di rilevamento secondario.
• Per una colorazione ottimale, titolare l'anticorpo sul tipo cellulare bersaglio (ad es., monociti umani, macrofagi o linee cellulari dendritiche) per determinare la concentrazione di lavoro.
• Includere un controllo isotipo appropriato (IgG di coniglio coniugato con APC, clone corrispondente) e, se si utilizzano sospensioni cellulari derivate da sangue intero o tessuto, pre-incubare con un reagente di blocco del recettore Fc per minimizzare il legame aspecifico.
• Poiché SIRPα non è espresso sui linfociti T, questi possono servire come controllo negativo interno; convalidare la specificità nelle proprie condizioni sperimentali utilizzando popolazioni cellulari positive e negative note.

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