Anticorpo monoclonale coniglio APC anti-CD196/CCR6 umano per FC - P51684

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD196/CCR6

• CCR6 è un recettore per la chemochina C-C CCL20 (PubMed:9169459) e il legame del ligando innesca l'afflusso intracellulare di ioni calcio (PubMed:20068036).
  Riferimenti correlati: PMID:9169459 PMID:20068036

• Agisce anche come recettore per le beta-difensine, legando DEFB1 per regolare la motilità degli spermatozoi e l'attività battericida (PubMed:25122636), e mediando risposte chemiotattiche tramite DEFB4/DEFB4A/B (PubMed:20068036).
  Riferimenti correlati: PMID:25122636 PMID:20068036

• La coppia CCL20-CCR6 dirige la chemiotassi delle cellule dendritiche, delle cellule T effettrici/di memoria e delle cellule B, svolgendo un ruolo critico nell'omeostasi immunitaria cutanea e mucosa e nell'infiammazione (PubMed:21376174).
  Riferimenti correlati: PMID:21376174

• CCR6 è essenziale per il reclutamento sia delle cellule Th17 pro-infiammatorie che delle cellule T regolatorie (Tregs) nei siti infiammatori, e per la normale migrazione delle cellule Th17 nelle placche di Peyer intestinali.

• Nella biologia delle cellule B, CCR6 è necessario per la localizzazione delle cellule B nella cupola subepiteliale delle placche di Peyer, per un efficiente switch di classe IgA, per la corretta distribuzione anatomica delle cellule B di memoria nella milza e per le risposte di richiamo secondarie.

• Nel sistema riproduttivo, CCR6 regola positivamente la motilità e la chemiotassi degli spermatozoi tramite il legame con CCL20 (PubMed:23765988).
  Riferimenti correlati: PMID:23765988

• A livello subcellulare, CCR6 è localizzato sulla membrana cellulare e sulla superficie cellulare, coerente con il suo ruolo di recettore transmembrana.

• CCR6 è espresso nella milza, nei linfonodi, nell'appendice, nel fegato fetale e nelle cellule T e B, ma non nelle cellule NK, nei monociti o nei granulociti. Negli spermatozoi, si localizza principalmente nella coda e nella regione postacrosomale.

• Strutturalmente, CCR6 è un recettore accoppiato a proteine G con sette eliche transmembrana, contenente ponti disolfuro, siti di glicosilazione e caratteristiche di elaborazione proteolitica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Come anticorpo coniugato APC, è pronto all'uso per la citometria a flusso diretta. Proteggerlo da un'esposizione prolungata alla luce per preservare la stabilità del fluoroforo.
• Ottimizzare la colorazione titolando l'anticorpo su un intervallo (es. 0,1–10 µg/mL) utilizzando una linea cellulare pertinente o cellule primarie note per esprimere CCR6, come sottopopolazioni di cellule T o cellule dendritiche.
• Includere controlli di isotipo appropriati e un colorante di vitalità per escludere le cellule morte, e considerare il blocco dei recettori Fc per campioni con alta espressione di recettori Fc.
• Per la colorazione intracellulare di CCR6 (es. se si analizza la co-espressione di citochine), validare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione; notare che APC è compatibile con i tamponi comunemente utilizzati.
• Validare le prestazioni nella specifica matrice del campione (es. sangue intero, PBMC, digestioni tissutali) valutando il rapporto segnale/rumore e la risoluzione delle popolazioni positive rispetto a quelle negative.

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