Anticorpo monoclonale APC coniglio anti-Umano CD275/B7-H2/ICOSL per FC - O75144

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del ligando ICOS

• ICOSLG codifica per il ligando ICOS (noto anche come B7-H2, B7RP-1, CD275, GL50), un membro della famiglia B7 di proteine di regolazione immunitaria. Lo splicing alternativo genera multiple isoforme.
• Funziona come ligando per il recettore specifico delle cellule T ICOS, fornendo segnali di costimolazione che promuovono la proliferazione delle cellule T e la secrezione di citochine. Riferimenti correlati: PMID:11007762 PMID:11023515 PMID:30498080
• Induce la proliferazione delle cellule B e la differenziazione in plasmacellule, contribuendo all'immunità umorale.
• Nelle cellule endoteliali, il ligando ICOS è essenziale per la corretta transmigrazione dei neutrofili in risposta a chemiotattici come CXCL8/IL-8 e fMLP. Riferimenti correlati: PMID:30498080
• Localizzazione subcellulare: Membrana cellulare, coerente con il suo ruolo di ligando per recettore transmembrana.
• Modificazioni post-traduzionali: Glicoproteina con legami disolfuro, caratteristica delle proteine contenenti domini di immunoglobulina.
• Distribuzione tissutale: Ampiamente espressa a livello di mRNA; a livello proteico, rilevata sulle cellule B del sangue periferico, monociti, cellule dendritiche derivate da monociti e all'interno dei linfonodi, dei leucociti e della milza.
• Parole chiave: Immunità adattiva, attivazione delle cellule B, Dominio di immunoglobulina, Elica transmembrana, tra gli altri.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per la citometria a flusso, utilizzare questo anticorpo coniugato APC per la colorazione per immunofluorescenza diretta di cellule umane vive per preservare la conformazione del ligando ICOS di superficie.
• Validare la reattività dell'anticorpo nel proprio specifico sistema sperimentale; i livelli di espressione possono variare in base al tipo di cellula e allo stato di attivazione.
• Poiché l'immunogeno copre il dominio extracellulare (aa 19-256), l'anticorpo probabilmente riconosce la conformazione nativa del CD275 espresso sulla superficie.
• Eseguire una titolazione ottimale dell'anticorpo (es. 0,1–5 µg/mL) per ottenere il miglior rapporto segnale/rumore e includere i controlli di isotipo appropriati.
• Evitare passaggi di fissazione o permeabilizzazione che potrebbero denaturare l'epitopo extracellulare; se è richiesta la fissazione, testare la compatibilità in anticipo.
• Per l'analisi qualitativa, considerare un protocollo di colorazione indiretta in due passaggi se la coniugazione diretta risulta in un segnale insufficiente.
• La reattività crociata con specie non umane non è stata riportata; utilizzare solo per campioni umani in base ai dati di validazione attuali.

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