Anticorpo monoclonale APC di coniglio anti-umano CD40 per FC - P25942

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD40

• Nome completo ufficiale: membro 5 della superfamiglia dei recettori del fattore di necrosi tumorale (CD40); noto anche come antigene di superficie delle cellule B CD40, Bp50, recettore di CD40L, CDw40.
• Funziona come recettore per TNFSF5/CD40LG, trasducendo segnali mediati da TRAF6 e MAP3K8 che attivano ERK nei macrofagi e nelle cellule B, determinando la secrezione di immunoglobuline (per similarità). Riferimenti correlati: PMID:31331973
• Membro della superfamiglia dei recettori del fattore di necrosi tumorale, caratterizzata da ripetizioni extracellulari ricche di cisteina e da un dominio transmembrana.
• Localizzazione subcellulare: prevalentemente una proteina di membrana di tipo I a singolo passaggio; esiste un'isoforma secreta dovuta allo splicing alternativo.
• Specificità tissutale: altamente espresso sui linfociti B e rilevato nei carcinomi primari, con una più ampia espressione nelle cellule immunitarie in condizioni di attivazione.
• Parole chiave e caratteristiche post-traduzionali: legame disolfuro, glicoproteina, splicing alternativo, variante associata a malattia, peptide segnale, proteoma di riferimento.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende il dominio extracellulare (amminoacidi 21-193), suggerendo un forte riconoscimento del CD40 nativo di superficie; per la citometria a flusso, considerare prestazioni ottimali senza fissazione per la colorazione di cellule vive.
• Per la FC, validare l'anticorpo a un intervallo di diluizioni (ad es., 0,5-5 µg per 10^6 cellule) utilizzando controlli positivi (ad es., linee cellulari linfoblastoidi umane) e controlli negativi (ad es., cellule CD40-negative).
• Se si valuta il CD40 intracellulare, includere una fase di permeabilizzazione dopo la colorazione di superficie; tenere presente che l'immunogeno copre l'ectodominio, ma può comunque rilevare isoforme intracellulari.
• Sebbene sia stato testato principalmente nella FC, questo anticorpo monoclonale può essere utilizzato anche in altri immunodosaggi (ad es., ELISA, immunoistochimica) dopo un'adeguata ottimizzazione; confermare con campioni pertinenti.

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