Anticorpo monoclonale coniugato APC di coniglio anti-CD81 umano per citometria a flusso - P60033

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD81

• CD81 (noto anche come TAPA-1 o Tspan28) è una tetraspanina di 26 kDa contenente più domini transmembrana e un legame disolfuro conservato, che funge da componente strutturale di microdomini di membrana specializzati.
• Sui linfociti B attivati, CD81 organizza microdomini arricchiti in tetraspanine (TERM) essenziali per il traffico e la compartimentazione di CD19, riducendo così la soglia per l'attivazione mediata dal recettore delle cellule B (BCR) e la produzione di anticorpi. Riferimenti correlati: PMID:16449649, PMID:20237408, PMID:27881302, PMID:15161911
• Nei linfociti T, CD81 facilita la localizzazione della catena zeta di CD3 alle sinapsi immunologiche, contribuendo alla costimolazione e alla polarizzazione verso un fenotipo di linfociti T helper di tipo 2. Riferimenti correlati: PMID:22307619, PMID:23858057, PMID:8766544
• Presente nei compartimenti di classe II del MHC, CD81 potrebbe svolgere un ruolo anche nella presentazione dell'antigene. Riferimenti correlati: PMID:8409388, PMID:8766544
• CD81 regola negativamente la fusione dei macrofagi in cellule giganti multinucleate associandosi a CD9 e alle integrine beta-1/beta-2. Riferimenti correlati: PMID:12796480
• Nei linfociti T, CD81 controlla i livelli intracellulari di dNTP dirigendo la degradazione proteasomiale della dNTPasi SAMHD1. Riferimenti correlati: PMID:28871089
• CD81 agisce come recettore critico per l'ingresso del virus dell'epatite C (HCV) negli epatociti, formando un complesso con la claudina-1 (CLDN1). È anche specificamente richiesto per l'infettività degli sporozoiti di Plasmodium falciparum nelle cellule epatiche umane.
• A livello subcellulare, CD81 si localizza sulla membrana cellulare, in particolare nella regione basolaterale. È espresso sui linfociti B, epatociti, monociti/macrofagi e sia sui linfociti T CD4+ naive che di memoria.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde all'ampio anello extracellulare (LEL, amminoacidi 114-199) del CD81 umano, un dominio coinvolto nel legame dei ligandi e nelle interazioni virali; gli anticorpi che mirano a questa regione possono riconoscere le conformazioni native e sono spesso adatti per la colorazione di superficie in citometria a flusso.
• Per la citometria a flusso, titolare il coniugato APC per ottimizzare il rapporto segnale/rumore, utilizzando controlli positivi noti (ad es. linfociti B del sangue periferico o linee cellulari trasfettate con CD81) e controlli negativi per stabilire la selezione (gating).
• A causa dell'ampia espressione di CD81 sui leucociti e sugli epatociti, includere appropriati controlli isotipo e considerare una doppia colorazione con marcatori di lignaggio per valutare accuratamente l'espressione specifica del tipo cellulare.
• Se si utilizza questo anticorpo per studiare l'ingresso virale mediato da CD81 o l'aggregazione dei recettori, validare nel sistema di campioni rilevante (ad es. epatociti primari o linee cellulari di linfociti B) in condizioni di attivazione per garantire un rilevamento corretto.

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