Anticorpo monoclonale APC coniglio anti-IgG umana (Fc) per citometria a flusso - P01857

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della regione costante della IgG1 umana

• L'immunoglobulina pesante costante gamma 1 (IGHG1) è la regione costante della catena pesante gamma 1, che definisce l'isotipo IgG1. È espressa sia come recettore legato alla membrana sui linfociti B sia come anticorpo secreto nel plasma.
• La IgG1 legata alla membrana funge da recettore antigenico dei linfociti B, innescando l'espansione clonale e la differenziazione dopo il legame con l'antigene. Gli anticorpi IgG1 secreti mediano la fase effettrice dell'immunità umorale tramite la loro regione costante (Fc).
• La regione di legame dell'antigene è formata dal dominio variabile della catena pesante accoppiato alla catena leggera. Una notevole affinità antigenica è ottenuta attraverso il riarrangiamento V-(D)-J, l'ipermutazione somatica e la maturazione dell'affinità.
• La regione costante della IgG1 interagisce tramite la sua porzione Fc con i recettori Fc sulle cellule immunitarie innate e con il sistema del complemento. Questa interazione media la citotossicità cellulare dipendente dall'anticorpo (ADCC), la citotossicità dipendente dal complemento (CDC) e le risposte infiammatorie, portando alla neutralizzazione dei patogeni. Riferimenti correlati: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• Subcellularmente, la IgG1 si trova secreta e ancorata alla membrana cellulare dei linfociti B. La forma legata alla membrana contiene un'elica transmembrana.
• Le caratteristiche principali includono ponti disolfuro che stabilizzano la piegatura dell'immunoglobulina, siti di glicosilazione importanti per le funzioni effettrici e la capacità di splicing alternativo. La generazione della IgG1 coinvolge la ricombinazione di cambio classe da IgM/IgD, diversificando il repertorio di anticorpi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un frammento ricombinante della regione Fc; pertanto l'anticorpo reagisce con la regione costante delle catene pesanti della IgG1 umana. Si prevede che riconosca sia la forma membranare che quella secreta.
• Questo coniugato è validato per citometria a flusso. Per risultati ottimali, titrare l'anticorpo sulla popolazione cellulare bersaglio per determinare la concentrazione di saturazione e minimizzare il fondo. Includere appropriati controlli isotipici.
• Essendo un reagente coniugato con APC, proteggere l'anticorpo da esposizioni prolungate alla luce ed evitare molteplici cicli di congelamento-scongelamento. Conservare secondo le istruzioni del produttore.
• Nell'analisi di citometria a flusso, si consiglia di utilizzare un colorante di vitalità per escludere le cellule morte, poiché possono legare gli anticorpi in modo non specifico. Confermare la specificità colorando cellule con profili di espressione di IgG noti.

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