Anticorpo monoclonale APC coniglio anti-Uomo/Mouse PDGFRα/CD140a per FC - P16234

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PDGFRα

• Il recettore alfa del fattore di crescita derivato dalle piastrine (PDGFRα) è un recettore tirosin-chinasico di superficie cellulare che lega PDGFA, PDGFB e PDGFC, avviando cascate di segnalazione che regolano proliferazione, sopravvivenza, chemiotassi e differenziazione cellulare. (UniProt: P16234)
• Il recettore svolge ruoli essenziali nello sviluppo embrionale, inclusi la formazione dello scheletro, la chiusura cefalica, lo sviluppo della mucosa gastrointestinale e la formazione dei villi intestinali, ed è necessario per la differenziazione delle cellule staminali mesenchimali derivate dal midollo osseo.
• PDGFRα è codificato dal gene PDGFRA ed è anche noto come CD140a, PDGFR2 e PDGFR-2; lo splicing alternativo genera molteplici isoforme e la proteina contiene domini simili alle immunoglobuline nella sua regione extracellulare.
• L'attivazione indotta dal ligando porta alla fosforilazione di effettori a valle come PIK3R1, PLCG1 e PTPN11, e promuove la segnalazione attraverso le vie AKT1, MAPK/ERK e STAT, modulando diverse risposte cellulari.
• Subcellolarmente, PDGFRα è localizzato sulla membrana cellulare, oltre che nell'apparato di Golgi e nel ciglio primario, riflettendo il suo traffico dinamico e i suoi ruoli nella segnalazione.
• Il recettore è ampiamente espresso, con rilevazione in piastrine, cervello, fibroblasti, muscolo liscio, cuore e embrione, e si trova anche in tumori del colon primari e metastatici e nel tessuto colonico normale.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, fosforilazione e ubiquitinazione; la proteina è classificata come proto-oncogene ed è associata a diverse varianti patologiche.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 24-524), quindi questo anticorpo è adatto per rilevare PDGFRα di superficie in cellule non fissate o fissate non permeabilizzate tramite citometria a flusso.
• Per la citometria a flusso, titolare il coniugato APC per determinare la concentrazione di colorazione ottimale e utilizzare controlli isotipo appropriati e blocco del recettore Fc per ridurre al minimo il legame non specifico.
• Poiché questo anticorpo ha reattività crociata con PDGFRα murino, validare il pattern di colorazione in linee cellulari di topo o cellule primarie per confermare la specificità nel sistema modello previsto.
• L'APC è un fluorocromo brillante; assicurare una corretta configurazione di laser e filtri (ad esempio, eccitazione a 633-635 nm, emissione a 660/20) e includere coloranti di vitalità per escludere le cellule morte che possono legare l'anticorpo in modo non specifico.

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