Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CD32 di topo coniugato con APC per citometria a flusso (FC) - P08101

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD32

• Recettore II della regione Fc delle immunoglobuline gamma a bassa affinità (FcγRIIB), noto anche come CD32, codificato dal gene Fcgr2b nel topo. Lo splicing alternativo produce più isoforme con proprietà funzionali distinte.
• Si lega alla regione Fc delle immunoglobuline gamma in complesso con bassa affinità, mediando funzioni effettrici e regolatorie quali la fagocitosi dei complessi antigene-anticorpo e la modulazione della produzione di anticorpi da parte delle cellule B.
• Le isoforme IIB1 e IIB1' formano cappucci, ma non riescono a mediare l'endocitosi o la fagocitosi, mentre l'isoforma IIB2 può mediare l'endocitosi dei complessi immunitari solubili attraverso fossette rivestite di clatrina.
• La coaggregazione con i recettori delle cellule B (BCR), i recettori delle cellule T (TCR) o i recettori Fc riduce rispettivamente l'attivazione delle cellule B, delle cellule T e dei mastociti.
• È localizzato sulla membrana cellulare, si trova anche nel citoplasma associato al citoscheletro e un'isoforma secreta (IIB3) viene rilasciata dai macrofagi nel siero.
• È ampiamente espresso nelle cellule ematopoietiche; l'isoforma IIB1 è espressa preferenzialmente nella linea linfoide, IIB2 nella linea mieloide e IIB3 è solubile nel siero.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, fosforilazione, ponti disolfuro e la presenza di un peptide segnale e di un dominio transmembrana; appartiene alla superfamiglia delle immunoglobuline.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• In quanto anticorpo monoclonale, si prevede una prestazione costante tra i diversi lotti. Titolare l'anticorpo per determinare la diluizione di lavoro ottimale per il tipo di cellule e le condizioni sperimentali specifici.
• Per la citometria a flusso, includere adeguate fasi di blocco dei recettori Fc e controlli isotipici per ridurre al minimo il legame aspecifico, soprattutto quando si utilizzano cellule con elevata espressione dei recettori Fc.
• Il coniugato APC offre una fluorescenza intensa adatta ai pannelli multicolore; assicurarsi di includere controlli di compensazione appropriati quando viene combinato con altri fluorofori.
• Le isoforme di CD32 sono espresse in modo differenziale; se è necessaria una rilevazione specifica per isoforma, convalidare il sistema modello utilizzando la letteratura o metodi alternativi.
• La colorazione della superficie cellulare con questo anticorpo può richiedere l'ottimizzazione dei protocolli di fissazione e permeabilizzazione per la colorazione intracellulare combinata.

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