Anticorpo monoclonale APC coniglio anti-mouse CD366 (TIM-3) per citometria a flusso - Q8VIM0

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD366 (TIM-3)

• L'omologo del recettore cellulare 2 del virus dell'epatite A (HAVCR2), noto anche come proteina 3 contenente domini di immunoglobulina e mucina dei linfociti T (TIM-3) o proteina di membrana 3 dei linfociti T, è una glicoproteina transmembrana di tipo I appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline. Lo splicing alternativo produce isoforme e la sequenza canonica murina ha un peso molecolare calcolato di circa 31 kDa (22 kDa osservati a causa della glicosilazione).
• Funziona come recettore immunomodulatorio con ruoli generalmente inibitori, sopprimendo le risposte autoimmuni e alloimmuni mediate dai linfociti T helper di tipo 1 (Th1) e promuovendo la tolleranza immunologica (PubMed:14556006, PubMed:18006747). Nei linfociti T CD8+, attenua la segnalazione TCR bloccando le attività dei promotori NF-kappaB e NFAT, riducendo la secrezione di IL-2 (Per somiglianza). Riferimenti correlati: PMID:14556006 PMID:18006747
• Tuttavia, sono state riportate funzioni attivanti dipendenti dal contesto, incluso il potenziamento della segnalazione TCR nei linfociti T tramite ZAP70, LCP2, LCK e FYN (PubMed:21807895) e il potenziamento delle risposte dei linfociti T CD8+ durante l'infezione acuta (PubMed:24567532). Sulle cellule natural killer (NK), agisce come corecettore per potenziare la produzione di IFN-gamma, ma può anche sopprimere la citotossicità a seconda delle condizioni (PubMed:25337993). Riferimenti correlati: PMID:21807895 PMID:24567532 PMID:25337993
• TIM-3 è un recettore per LGALS9 (galettina-9). Questa interazione porta alla soppressione delle risposte dei linfociti T e all'apoptosi attraverso la fosforilazione di HAVCR2 e il distacco da BAG6 (PubMed:22863785). Contribuisce anche all'immunità innata stimolando la secrezione di IL-1β dei macrofagi e limitando la crescita batterica intracellulare dopo il legame con LGALS9 sui macrofagi infetti da Mycobacterium tuberculosis (PubMed:20937702). Riferimenti correlati: PMID:22863785 PMID:20937702
• Inoltre, TIM-3 si lega alla fosfatidilserina (PtSer) in modo dipendente dal calcio, mediando la fagocitosi delle cellule apoptotiche da parte delle cellule dendritiche (PubMed:20083673, PubMed:19224762). Nelle cellule dendritiche infiltranti il tumore, sopprime le risposte immunitarie innate mediate da acidi nucleici interagendo con HMGB1 (PubMed:22842346). Riferimenti correlati: PMID:20083673 PMID:19224762 PMID:22842346
• La localizzazione subcellulare include la membrana plasmatica, le giunzioni cellulari e una forma secreta. Le modificazioni post-traduzionali includono ponti disolfuro, glicosilazione e fosforilazione, che regolano la sua funzione e le interazioni di segnalazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 20-191), garantendo il riconoscimento del recettore nativo sulla superficie cellulare, adatto per la citometria a flusso.
• Considerare di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale di colorazione per il proprio specifico tipo cellulare, poiché i livelli di espressione di TIM-3 variano in base allo stato di attivazione.
• Dato che TIM-3 è espresso sui linfociti T attivati, sui macrofagi, sulle cellule dendritiche, sulle cellule NK e sui mastociti, validare l'anticorpo nel sistema di campione pertinente e includere i controlli di isotipo appropriati.
• Per la citometria a flusso, utilizzare un colorante di vitalità per escludere le cellule morte, poiché TIM-3 può legare la fosfatidilserina sulle cellule apoptotiche, causando potenzialmente una colorazione aspecifica.

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