Anticorpo Monoclonale APC Conigliato anti-Mouse IL-17A per Citometria a Flusso (Intracellulare) - Q62386

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di IL-17A

• L'Interleuchina-17A (IL-17A), nota anche come CTLA-8, è una citochina proinfiammatoria appartenente alla famiglia delle IL-17 e un marcatore effettrice caratteristico delle cellule T helper 17 (Th17), svolgendo un ruolo centrale nella difesa antimicrobica dell'ospite e nell'integrità tissutale. Riferimenti correlati: PMID:18025225 PMID:19144317 PMID:26431948
• Trasduce il segnale tramite il recettore eterodimerico IL17RA-IL17RC, reclutando TRAF3IP2 e attivando le vie di segnalazione NF-κB dipendenti da TRAF6 e MAP chinasi per indurre la trascrizione di citochine, chemochine, peptidi antimicrobici e metalloproteinasi della matrice, orchestrando così forti risposte infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:16200068 PMID:17911633 PMID:19144317
• Induce principalmente l'attivazione e il reclutamento dei neutrofili nei siti di infezione e infiammazione; nell'epitelio delle vie aeree, media la chemiotassi dei neutrofili tramite l'induzione delle chemochine CXCL1 e CXCL5. Riferimenti correlati: PMID:18025225 PMID:27923703
• Negli organi linfoidi secondari, IL-17A contribuisce alla formazione dei centri germinativi modulando la chemiotassi delle cellule B verso CXCL12 e CXCL13, migliorando la ritenzione delle cellule B, l'ipermutazione somatica e la differenziazione in plasmacellule. Riferimenti correlati: PMID:18157131
• Funge da citochina effettrice per le cellule T gamma-delta, le cellule iNKT e le cellule linfoidi innate di gruppo 3, promuovendo l'infiammazione neutrofila precoce e la rapida eliminazione batterica. Riferimenti correlati: PMID:17372004 PMID:20364087 PMID:28709803
• Svolge un ruolo diretto nell'integrità della barriera epiteliale regolando la localizzazione dell'occludina (OCLN) e la biogenesi delle giunzioni serrate in caso di danno acuto; agisce in sinergia con IL‑17F per indurre la produzione di β-defensine antimicrobiche (DEFB1, DEFB103A, DEFB104A) dalle cellule epiteliali mucose. Riferimenti correlati: PMID:26431948 PMID:19144317
• Contribuisce alla difesa antivirale dell'ospite: aumenta la citotossicità delle cellule T contro il virus del Nilo occidentale, potenzia le risposte delle cellule B nell'infezione da virus dell'influenza A (H5N1) e guida la differenziazione delle cellule B‑1a per la produzione di IgM specifiche per il virus durante l'eliminazione dell'H1N1. Riferimenti correlati: PMID:21946434 PMID:26735852 PMID:27795421
• Glicoproteina secreta con un peso molecolare di ~17,5 kDa (precursore), contenente un peptide segnale e un legame disolfuro; espressa prevalentemente dalle cellule Th17 e, in misura minore, dalle cellule linfoidi innate, dalle sottopopolazioni di cellule T γδ e dalle cellule iNKT.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• Per la citometria a flusso intracellulare, stimolare le cellule T di topo o le popolazioni cellulari rilevanti con PMA/ionomicina in presenza di un inibitore del trasporto proteico (ad es. brefeldina A) per 4–6 ore prima della colorazione, per migliorare la rivelazione di IL‑17A.
• Dopo la colorazione di superficie, fissare e permeabilizzare le cellule utilizzando un kit di fissazione/permeabilizzazione appropriato, e includere un controllo isotypo adeguato e un colorante di vitalità per monitorare il legame non specifico e distinguere le cellule vive da quelle morte.
• Eseguire la titolazione dell'anticorpo per determinare la diluizione ottimale per il tuo specifico tipo cellulare e le condizioni di attivazione; la variabilità da clone a clone può influenzare l'affinità di legame.
• Validare la specificità in campioni di topo knockout per IL‑17A o utilizzando un peptide di bloccaggio/antigene di controllo quando disponibile.
• Tenere conto che l'anticorpo è stato generato contro gli amminoacidi 26–158, che comprendono la forma matura secreta ma non il peptide segnale; confermare la reattività nel contesto biologico di interesse.

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