APC/Cyanine7 Coniugato Anticorpo Monoclonale di Coniglio anti-Umano CD56/NCAM1 per Citometria a Flusso - P13591

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di NCAM1

• La molecola di adesione cellulare neurale 1 (NCAM1) è una proteina di adesione cellulare della superfamiglia delle immunoglobuline, caratterizzata da domini simili a immunoglobuline e ripetizioni di fibronectina di tipo III.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme, inclusi varianti transmembrana e ancorate al GPI, e alcune forme secrete.
• NCAM1 media l'adesione cellulare omofila ed eterofila, essenziale per l'adesione neurone-neurone, la fascicolazione dei neuriti e la crescita dei neuriti.
• Inoltre, funge da recettore cellulare ospite per il virus della rabbia e il virus Zika, facilitando l'ingresso virale.
• La proteina è localizzata principalmente sulla membrana cellulare, ma esistono isoforme secrete.
• Le modifiche post-traduzionali includono N-glicosilazione, fosforilazione, formazione di legami disolfuro e aggiunta di ancoraggi GPI, che influenzano la sua struttura e funzione.
• La massa molecolare teorica del precursore non processato è di ~94,6 kDa, ma la glicosilazione aumenta il peso apparente a ~95 kDa e oltre.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno era una proteina ricombinante che comprendeva gli amminoacidi 20-413, rappresentanti il dominio extracellulare di NCAM1 umano. Questo design favorisce il riconoscimento di CD56 espresso in superficie nella citometria a flusso.
• Per la citometria a flusso, utilizzare il coniugato APC/Cyanine7 direttamente; considerare di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale per il proprio tipo cellulare.
• Validare l'anticorpo in sistemi di campione rilevanti: CD56 è espresso nelle cellule natural killer umane e in sottogruppi di neuroni, quindi controlli positivi appropriati includono linee cellulari NK umane o cellule mononucleate del sangue periferico.
• Assicurarsi che il citofluorimetro sia dotato di un laser appropriato e di un set di filtri per la rilevazione APC-Cy7 (eccitazione ~633-650 nm, emissione ~780 nm).
• Poiché l'anticorpo è specifico per CD56 umano, confermare la reattività incrociata con la specie bersaglio se si lavora con campioni non umani; la reattività incrociata è riportata solo per l'umano.
• Per prestazioni ottimali, seguire i protocolli standard di colorazione di superficie e includere appropriati controlli isotipo.

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