Anticorpo monoclonale coniglio anti-mouse CD8a coniugato con APC/Cianina7 per citometria a flusso - P01731

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD8a

• La glicoproteina di superficie delle cellule T catena alfa CD8 (CD8a) è una proteina integrale di membrana che funge da corecettore per le molecole di classe I del MHC, svolgendo un ruolo essenziale nell'immunità adattiva e nel riconoscimento dei patogeni intracellulari.
• Il CD8a interagisce simultaneamente con il recettore delle cellule T (TCR) e il complesso MHC di classe I:peptide sulle cellule presentanti l'antigene, reclutando la chinasi Src LCK per avviare cascate di segnalazione che portano all'attivazione delle cellule T citotossiche, alla produzione di citochine e alla morte delle cellule bersaglio.
• Nelle cellule natural killer (NK), i omodimeri CD8A promuovono la formazione di coniugati e la lisi di più cellule bersaglio, e supportano la differenziazione dei linfociti attivati in cellule T di memoria CD8+.
• La proteina è localizzata sulla membrana cellulare tramite un dominio transmembrana a passaggio singolo ed è modificata da palmitoilazione, glicosilazione e formazione di legami disolfuro all'interno del suo dominio simile a immunoglobulina.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme e la proteina è classificata sotto parole chiave come immunità adattativa, legame disolfuro, glicoproteina, palmitato e segnale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il tipo di cellule specifico e le condizioni di colorazione; una gamma di diluizione iniziale di 1:100–1:400 è tipica per gli antigeni di superficie.
• Utilizzare controlli isotipici appropriati e discriminazione vivi/morti per garantire un gating accurato; gli splenociti o i timociti di topo servono come tessidi di controllo positivo ideali per l'espressione del CD8a.
• APC/Cianina7 è un fluoroforo in tandem; minimizzare l'esposizione alla luce e tenere presente che le fasi di fissazione e permeabilizzazione possono alterare la stabilità del colorante in tandem e l'intensità della fluorescenza.
• Convalidare il legame dell'anticorpo nelle vostre condizioni sperimentali confrontando i modelli di colorazione con popolazioni biologiche positive e negative note.

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