APC/Cyanine7 Anticorpo Monoclonale di Ratto Anti-Topo CD45R/B220 per FC - P06800

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD45R/B220 (CD45)

• Il CD45, designato come tirosina-proteina fosfatasi C di tipo recettore, è una glicoproteina transmembrana nota anche come antigene comune dei leucociti (L-CA), Ly-5 o T200. Funge da regolatore critico dell'attivazione e della differenziazione dei linfociti.
• Come tirosina-proteina fosfatasi, il CD45 è essenziale per l'attivazione delle cellule T attraverso il recettore dell'antigene. Regola positivamente la co-attivazione delle cellule T legandosi a DPP4, facilitando la trasduzione del segnale.
• La regione intracellulare contiene due domini fosfatasi in tandem. Il primo dominio (D1) possiede attività catalitica, mentre il secondo dominio (D2) influenza la specificità del substrato di D1, modulando finemente l'output del segnale.
• Durante l'attivazione delle cellule T, il CD45 recluta e defosforila molecole di segnalazione chiave, tra cui SKAP1 e FYN. Defosforila anche LYN, modulando così l'attività chinasica di LYN e le vie di segnalazione a valle.
• All'interfaccia tra le cellule che presentano l'antigene e le cellule T, il CD45 interagisce con CLEC10A sulle cellule dendritiche immature. Questa interazione, che coinvolge il CD45 portante l'antigene Tn sulle cellule T effettrici, modula la soglia di attivazione delle cellule T per limitare l'autoreattività.
• Il CD45 è localizzato sulla membrana cellulare, nei raft di membrana e nelle sinapsi immunologiche, posizionandolo al centro della segnalazione immunitaria. Lo splicing alternativo genera multiple isoforme; l'isoforma B220, riconosciuta da questo anticorpo, è espressa prevalentemente sui linfociti B ed è un classico marcatore del lignaggio delle cellule B.
• Parole chiave: splicing alternativo, membrana cellulare, glicoproteina, idrolasi, membrana, fosfoproteina, proteina fosfatasi, sinapsi, transmembrana, elica transmembrana.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è fornito come coniugato APC/Cyanine7, ottimizzato per la citometria a flusso (FC). Verificare le compensazioni di fluorescenza utilizzando controlli colorati singolarmente e includere un controllo isotipo appropriato per impostare le soglie di gating.
• L'immunogeno consiste nella proteina ricombinante di CD45R/B220 di topo. Per una colorazione ottimale, titolare l'anticorpo nella matrice biologica rilevante (ad es. sospensioni cellulari di milza o linfonodo di topo) per determinare la concentrazione che fornisce il massimo segnale specifico con il minimo fondo.
• Considerare di progettare attentamente il pannello multicolore per evitare sovrapposizioni spettrali; APC/Cyanine7 è tipicamente eccitato da un laser a 635 nm ed emette nel canale del rosso lontano, richiedendo compensazione con altri fluorofori in quel range.
• Validare l'espressione nel sistema campione previsto, come i tessuti linfoidi di topo, dove B220 è altamente espresso sulle cellule B. Per applicazioni non standard, sono raccomandati esperimenti pilota.

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