APOA1 pAb di coniglio per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P02647

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di APOA1

• L'Apolipoproteina A-I (APOA1) è la componente proteica principale delle lipoproteine plasmatiche ad alta densità (HDL) e si trova anche nei chilomicroni.
• Svolge un ruolo centrale nel trasporto inverso del colesterolo, promuovendo l'efflusso di colesterolo dai tessuti e agendo come cofattore per la lecitina-colesterolo aciltransferasi (LCAT), facilitando l'esterificazione e la clearance del colesterolo.
• Come parte del complesso della proteina attivante lo sperma (SPAP) nel plasma seminale, APOA1 contribuisce all'attivazione della motilità degli spermatozoi.
• APOA1 è una proteina secreta sintetizzata principalmente nel fegato e nell'intestino tenue, e circola nel plasma come componente delle particelle di HDL.
• La proteina subisce modificazioni ossidative presso le posizioni Met-110 e Met-136; queste forme ossidate sono elevate negli individui a maggior rischio di malattia coronarica, inclusi portatori del genotipo eNOSa/b e fumatori, e sono arricchite nelle lesioni aortiche con l'aumentare della gravità della malattia.
• APOA1 appartiene a una famiglia di apolipoproteine coinvolte nel trasporto e nel metabolismo dei lipidi, con annotazioni che la collegano al metabolismo del colesterolo, al metabolismo degli steroidi e all'aterosclerosi.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicazione, fosforilazione, palmitoilazione e nitrazione, che possono modularne la funzione e i ruoli patologici nell'amiloidosi e nella neuropatia.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla sequenza della proteina matura (amminoacidi 25-267) e copre gran parte di APOA1; questa regione è conservata tra uomo, topo e ratto, e supporta la reattività crociata riportata.
• Per il Western blotting, si prevede che APOA1 migri a circa 28 kDa, ma modificazioni post-traduzionali e l'associazione con le particelle di HDL possono causare spostamenti; convalidate la dimensione della banda nel vostro sistema di campioni utilizzando controlli positivi appropriati (ad es. plasma umano, lisati di fegato).
• Nell'immunohistochimica (IHC-P), APOA1 è localizzata principalmente nello spazio extracellulare e nel citoplasma di epatociti ed enterociti; ottimizzate il recupero dell'antigene e considerate la co-colorazione con marcatori di HDL per confermare la specificità.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), tenete presente che APOA1 è secreta; la colorazione intracellulare può riflettere la proteina neo-sintetizzata nel reticolo endoplasmatico/Golgi; utilizzate condizioni senza siero o pulse-chase per migliorare la rivelazione.
• L'anticorpo è stato validato per ELISA; grazie alla sua natura policlonale, può riconoscere epitopi multipli, offrendo potenzialmente una maggiore sensibilità nelle configurazioni di ELISA sandwich se abbinato a un anticorpo di cattura adatto.
• Includete sempre controlli delle specie pertinenti (umana, topo, ratto) e dei tessuti (fegato, intestino tenue, plasma) per confermare la specificità sperimentale.

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