Anticorpo policlonale coniglio anti-AscL1 per WB e ELISA - P50553

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ASCL1

• ASCL1 (Achaete-scute omologo 1), noto anche come ASH1, HASH1, MASH1 e bHLHa46, è un membro della famiglia dei fattori di trascrizione basic helix-loop-helix (bHLH).
• Funziona come fattore di trascrizione pioniere, fondamentale per la differenziazione neuronale: accede alla cromatina chiusa permettendo ad altri fattori di legarsi e attivare i programmi di espressione genica neuronale.
• ASCL1 lega direttamente il motivo E box (5'-CANNTG-3') sui promotori per promuovere la trascrizione dei geni neuronali.
• Insieme a POU3F2/BRN2 e MYT1L, ASCL1 è sufficiente a riprogrammare fibroblasti e altre cellule somatiche in cellule neuronali indotte (iN) in vitro.
• Svolge ruoli essenziali nelle prime fasi dello sviluppo di specifiche linee neuronali nel sistema nervoso centrale (SNC) e periferico (SNP), inclusa la generazione di neuroni olfattivi e autonomi.
• ASCL1 agisce in sinergia con FOXN4 per specificare l'identità del neurone V2b invece di V2a a partire da progenitori bipotenziali p2 durante la neurogenesi del midollo spinale, probabilmente attraverso la segnalazione DLL4-NOTCH.
• La proteina si localizza nel nucleo, coerentemente con il suo ruolo di fattore di trascrizione, ed è soggetta a modifiche post-traduzionali come l'acetilazione (come indicato dalle parole chiave di UniProt).
• ASCL1 è coinvolto nello sviluppo delle cellule neuroendocrine nello stomaco ghiandolare ed è stato identificato in studi di proteomica; le mutazioni sono associate a varianti patologiche.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 150–236 di ASCL1 umano e comprende il dominio bHLH conservato, fondamentale per il legame con il DNA e la dimerizzazione. Questo progetto di progettazione bersaglia una regione funzionalmente conservata, contribuendo probabilmente alla reattività crociata osservata con topo e ratto.
• Per Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 25 kDa (sulla base dei dati UniProt), ma è opportuno considerare possibili modifiche post-traduzionali o spostamenti di migrazione specifici delle isoforme nel tuo campione.
• Validare l'anticorpo nel tuo specifico sistema di campionamento, includendo controlli positivi (ad esempio tessuto neurale o linee cellulari con differenziazione neurale) e negativi appropriati, soprattutto data la natura policlonale.
• Per ELISA, si ricorda che l'anticorpo è prodotto contro una proteina ricombinante; per l'analisi quantitativa si consiglia di utilizzare una curva di standardizzazione con l'immunogeno o una proteina bersaglio ricombinante.
• Poiché ASCL1 è un fattore di trascrizione nucleare, la preparazione del campione per WB deve includere l'estrazione nucleare o una lisisi efficiente per garantire un recupero adeguato della proteina.

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