Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Asymmetric DiMethyl-Histone H3 (R17) – Q16695/P68431 | WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'istone H3

L'istone H3 è un componente centrale del nucleosoma, che avvolge e compatta il DNA nella cromatina. Questo impacchettamento limita l'accessibilità del DNA ai macchinari cellulari necessari per processi come la trascrizione, la riparazione del DNA, la replicazione del DNA e la stabilità cromosomica. Gli istoni svolgono quindi un ruolo centrale nella regolazione dell'espressione genica e dell'integrità del genoma. Riferimenti correlati: UniProtKB Q16695 / P68431

La funzione degli istoni è fortemente regolata da un insieme diversificato di modificazioni post-traduzionali (PTM), spesso indicate come "codice istonico". Queste PTM includono acetilazione, metilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, tra le altre, e orchestrano il rimodellamento del nucleosoma e il reclutamento di proteine effettrici. Tra queste modificazioni, la metilazione dell'arginina – in particolare la dimetilazione asimmetrica – è un segnale epigenetico chiave associato all'attivazione e al silenziamento trascrizionale.

L'istone H3 esiste in più isoforme. L'H3.1 (P68431) dipendente dalla replicazione è espresso ampiamente in vari tessuti, mentre l'H3.1t (Q16695) è espresso specificamente nelle cellule testicolari, suggerendo ruoli specializzati nella spermatogenesi. Entrambe le isoforme si localizzano nel nucleo e sui cromosomi.

La dimetilazione asimmetrica dell'istone H3 all'arginina 17 (R17; posizione 18 nella sequenza precursore che include la metionina iniziatrice) è catalizzata dalla proteina arginina metiltransferasi CARM1 (PRMT4). Questa modificazione è implicata nella regolazione trascrizionale ed è un marcatore ben studiato di stati di cromatina attiva. Riferimenti correlati: PMID:15345777, PMID:15471871, PMID:16497732

Questo anticorpo riconosce specificamente l'istone H3 quando è dimetilato in modo asimmetrico a R17. Non rileva l'H3 non modificato o altri stati di metilazione come l'arginina dimetilata simmetricamente o monometilata in questo sito, rendendolo uno strumento prezioso per studiare la segnalazione mediata da CARM1 e la regolazione epigenetica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico progettato intorno alla dimetilarginina asimmetrica a R17 dell'istone H3 umano. Quando si esegue il western blotting (WB) o l'immunoistochimica (IHC-P), considerare l'uso di lisati cellulari o tissutali noti per esprimere questa modificazione (ad es. cellule HeLa o testicolo di topo) come controlli positivi.
• Poiché si prevede che questo anticorpo abbia un'ampia reattività crociata oltre a umano, topo e ratto, potrebbe essere adatto per rilevare la modificazione in altre specie. Tuttavia, si raccomanda la convalida nel sistema campione rilevante.
• Per l'ELISA, assicurarsi che l'antigene di ricoprimento contenga l'epitopo della dimetil-R17 asimmetrica, poiché l'anticorpo non riconoscerà peptidi non modificati o diversamente metilati.
• Poiché l'anticorpo è policlonale, la variabilità da lotto a lotto è un fattore da considerare; includere appropriati controlli negativi (ad es., peptide H3 non modificato) per confermare la specificità.

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