mAb coniglio contro Istone H3-R8 asimmetrico dimetilato (Q16695/P68431) per la ricerca epigenetica

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'Istone H3

L'Istone H3 è un componente fondamentale del nucleosoma, avvolge e compatta il DNA nella cromatina limitando l'accessibilità per processi come la trascrizione, la replicazione e la riparazione. Attraverso una complessa serie di modifiche post-traduzionali (PTM), gli istoni svolgono un ruolo centrale nella regolazione dell'espressione genica, della riparazione del DNA, della replicazione del DNA e della stabilità cromosomica: un fenomeno noto come codice istonico.

La dimetilazione asimmetrica dei residui di arginina (Rme2a) sulle code istoniche, inclusa quella all'R8 dell'Istone H3, è catalizzata dalle protein arginine methyltransferasi (PRMT) e contribuisce all'attivazione o al silenziamento trascrizionale a seconda del contesto genomico. Questa specifica modificazione fa parte del più ampio paesaggio epigenetico che regola la dinamica della cromatina.

Questo anticorpo riconosce due principali varianti dell'Istone H3: l'Istone H3.1t (codificato da H3-4/HIST3H3, UniProt Q16695) e l'Istone H3.1 canonico (codificato da più geni H3C, UniProt P68431). Mentre l'Istone H3.1 è espresso ubiquitous, l'Istone H3.1t mostra un'espressione specifica del testicolo. Entrambe le varianti si localizzano nel nucleo e sui cromosomi.

Riferimenti correlati: UniProt:Q16695, UniProt:P68431

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Western Blot (WB): È attesa una singola banda intorno ai 15 kDa. Utilizzare estratti nucleari o istoni estratti con acido come controlli positivi. Si consiglia di includere un test di competizione con peptide non modificato per confermare la specificità per la modificazione R8 asimmetrico dimetilato.
• Dot Blot (DB): Depositare peptidi antigenici (asimmetrico dimetil-R8 vs non modificato o simmetrico dimetil-R8) per valutare la specificità dell'anticorpo.
• Immunohistochimica (IHC-P): Si consiglia il recupero dell'antigene con tampone citrato (pH 6,0). Convalidare il segnale in tessuti noti per esprimere H3R8me2a e utilizzare controlli di isotipo per confermare la specificità della colorazione.
• ELISA: Adatto sia per formati ELISA diretti che sandwich. Ottimizzare le concentrazioni di rivestimento con il peptide immunogeno.
• Tutte le diluizioni e le condizioni sperimentali devono essere determinate empiricamente per il sistema specifico utilizzato.

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